سیویلیکا را در شبکه های اجتماعی دنبال نمایید.

Login
PapersConferencesJournals

بیان موقت فرم نوترکیب آنزیم اندونوکلئاز PARS II با روش آگرواینفیلتراسیون در گیاه توتون

Publish place: Modares Journal of Biotechnology، Vol: 9، Issue: 4
Publish Year: 1397
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 42

This Paper With 7 Page And PDF Format Ready To Download

DOWNLOAD Paper

Export:

Link to this Paper:
https://civilica.com/doc/2141275

Document National Code:

JR_BIOT-9-4_017

Index date: 24 December 2024

بیان موقت فرم نوترکیب آنزیم اندونوکلئاز PARS II با روش آگرواینفیلتراسیون در گیاه توتون abstract

اهداف: تولید پروتئین های نوترکیب در گیاهان تراریخته (زراعت مولکولی)، یکی از جنبه های کاربردی مهندسی ژنتیک محسوب می شود. پروتئین های تولیدشده توسط گیاهان بر خلاف سیستم های تولید مبتنی بر سلول های جانوری و باکتریایی به علت عدم وجود عوامل بیماری زای مشترک انسان و دام، بسیار ایمن هستند و هزینه تولید پایینی دارند. هدف این پژوهش، بیان موقت فرم نوترکیب آنزیم اندونوکلئاز PARS II با استفاده از روش آگرواینفیلتراسیون در گیاه توتون بود. مواد و روش ها: در مطالعه تجربی حاضر، امکان تولید فرم نوترکیب اندونوکلئاز PARS II با استفاده از سیستم بیان موقت به واسطه آگروباکتریوم مورد بررسی قرار گرفت. سازه بیانی pBI-Pars (مبتنی بر ناقل دوگانه pBI۱۲۱) حاوی توالی کامل رمزکننده PARS II، توالی کوتاه کوزاک در بالادست و توالی رمزکننده هشت آمینواسید هیستیدین در پایین دست ژن، ساخته و با روش آگرواینفلتراسیون به برگ های توتون (Nicotiana tabacum) تزریق شد. پس از گذشت ۷۲ ساعت، بیان ژن مورد نظر در نمونه های آگرواینفیلتره شده با واکنش RT-PCR و بلات نقطه ای با آنتی بادی ضدهیستیدین به ترتیب در سطح mRNA و پروتئین انجام شد. یافته ها: صحت سازه بیانی ساخته شده تایید شد و نتایج بلات نقطه ای با آنتی بادی ضدهیستیدین، بیان پروتئین نوترکیب PARS II را مورد تایید قرار داد، در حالی که هیچ نشانی از بیان پروتئین نوترکیب در گیاهان شاهد آگرواینفیلتره شده با سازه pBI۱۲۱ مشاهده نشد. مقادیر قابل توجهی از نوکلئاز نوترکیب PARS II در برگ های توتون تولید شد. نتیجه گیری: روش آگرواینفیلتراسیون یک روش موثر و کوتاه مدت برای تولید انبوه نوکلئاز خالص نوترکیب PARS II در گیاه توتون است.

بیان موقت فرم نوترکیب آنزیم اندونوکلئاز PARS II با روش آگرواینفیلتراسیون در گیاه توتون Keywords:

بیان موقت فرم نوترکیب آنزیم اندونوکلئاز PARS II با روش آگرواینفیلتراسیون در گیاه توتون authors

محمد فارسی

Crop Biotechnology & Breeding Department, Agriculture Faculty, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran

مهدیه میرزایی

Crop Biotechnology & Breeding Department, Agriculture Faculty, Ferdowsi University of Mashhad, Mashhad, Iran

جعفر ذوالعلی

Agricultural Biotechnology Department, Agriculture Faculty, Shahid Bahonar University of Kerman, Kerman, Iran

مراجع و منابع این Paper:

لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :
Tsuji T, Niida Y. Development of a simple and highly ...
Yeung AT, Hattangadi D, Blakesley L, Nicolas E. Enzymatic mutation ...
Vogiatzakis N, Kekou K, Sophocleous C, Kitsiou S, Mavrou A, ...
Shi Y, Terry SF, Terry PF, Bercovitch LG, Gerard GF. ...
Wang GX, Tan MK, Rakshit S, Saitoh H, Terauchi R, ...
Nieto C, Piron F, Dalmais M, Marco CF, Moriones E, ...
Brady SM, Provart NJ. Extreme breeding: Leveraging genomics for crop ...
Sokurenko EV, Tchesnokova V, Yeung AT, Oleykowski CA, Trintchina E, ...
Comai L, Young K, Till BJ, Reynolds SH, Greene EA, ...
Comai L, Henikoff S. TILLING: Practical single‐nucleotide mutation discovery. Plant ...
Holkers M, Maggio I, Liu J, Janssen JM, Miselli F, ...
Maier DA, Brennan AL, Jiang S, Binder-Scholl GK, Lee G, ...
Desai NA, Shankar V. Single-strand-specific nucleases. FEMS Microbiol Rev. ۲۰۰۳;۲۶(۵):۴۵۷-۹۱. ...
Mon H, Lee J, Fukushima M, Nagata Y, Fujii M, ...
Oleykowski CA, Mullins CRB, Godwin AK, Yeung AT. Mutation detection ...
Triques K, Sturbois B, Gallais S, Dalmais M, Chauvin S, ...
Zolala J, Bahrami AR, Farsi M, Matin MM, Yassaee VR. ...
Mirzaei M, Zolala J, Shalouzad A. Isolation, cloning and molecular ...
Huang FC, Studart-Witkowski C, Schwab W. Overexpression of hydroperoxide lyase ...
Kapila J, De Rycke R, Van Montagu M, Angenon G. ...
Sainsbury F, Thuenemann EC, Lomonossoff GP. pEAQ: Versatile expression vectors ...
Wydro M, Kozubek E, Lehmann P. Optimization of transient Agrobacterium-mediated ...
Yang B, Wen X, Kodali NS, Oleykowski CA, Miller CG, ...
Kozak M. The scanning model for translation: An update. J ...
Sambrook J, Green MR. Appendix ۱, Reagents and buffers. Molecular ...
Bradford MM. A rapid and sensitive method for the quantitation ...
Baron U, Imhoff U, Koch J, Leuer M, Weber J, ...
Pimkin M, Caretti E, Canutescu A, Yeung JB, Cohn H, ...
Bendahmane A, Sturbois B, Triques K, Caboche M, inventors; Genoplante-Valor, ...
نمایش کامل مراجع