بیان و خالص سازی پروتئین همراه با همانند سازی (Rep) جدایه استرالیایی ویروس پیچیدگی برگ گوجه فرنگی (Tomato leaf curl virus- Australia) در باکتری Escherichia coli
Publish place: 12th Congress of Iranian Genetics Society
Publish Year: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 1,680
This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CIGS12_0319
تاریخ نمایه سازی: 5 بهمن 1392
Abstract:
جدایه ی استرالیایی ویروس پیچیدگی برگ گوجه فرنگی (Tomato leaf curl virus-Australia (TLCV-Au یکی از اعضای تک بخشی جنس Begomovirus (تیره ی Geminiviridae) است. پروتئین همراه با همانند سازی جمینی ویروسها (رپ، Rep) تنها پروتئین مورد نیاز برای همانند سازی دیانای ویروس به حساب می آید. برای تهیه ی آموده ی خالص رپ، از یک سازه ی حاوی چارچوب خوانش C1 (چارچوب کد کننده ی رپ) که با استفاده از دو آنزیم HindIII و BamHI در ناقل بیان pQE30 تعبیه شده بود، استفاده گردید. تراریخت کردن سویه ی M15 باکتری Escherichia coli با استفاده از پلاسمید نوترکیب pQE30-C1 صورت پذیرفت، سپس بیان قطعه مورد نیاز به صورت یک پروتئین ترکیبی همراه با هیستدین در باکتری ا نجام شد. نتایج حاصل از الکتروفورز در ژل پلی آکریل آمید حاوی SDS پروتئینی با وزن مولکولی 44-42 کیلو دالتون را مشخص نمود و همچنین خالص سازی پروتئین مذکوردر شرایط غیر واسرشتی با استفاده از رزین Ni2+-NTA باند پروتئینی با همین اندازه را نشان داد. متوسط غلظت آموده های پروتئین خالص شده با استفاده از روش برادفورد در حدود 50 μg/ml تخمین زده شد. بیان پروتئینهای مخلتف جمینی ویروسها از جمله رپ میتواند در تعیین عملکرد پروتئینها و مطالعات سرولوژیکی مورد استفاده قرار گیرد.
Keywords:
ویروس پیچیدگی برگ گوجه فرنگی (TLCV) , پروتئین همراه با همانند سازی (Rep)
Authors
سعید تابعین
دانشجویان کارشناسی ارشد بیماری شناسی گیاهی دانشگاه شیراز
آمنه عنابستانی
دانشیار بیماری شناسی گیاهی دانشگاه شیراز
سیدعلی اکبر بهجنتیا
استاد بیماری شناسی گیاهی دانشگاه شیراز
کرامت الله ایزدپناه
مرکز تحقیقات ویروسشناسی گیاهی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شیراز
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :