طراحی و ساخت وکتورهای کلروپلاستی به منظور تولید پروتئین های نوترکیب
Publish place: 12th Congress of Iranian Genetics Society
Publish Year: 1391
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 1,477
This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CIGS12_0752
تاریخ نمایه سازی: 5 بهمن 1392
Abstract:
کلروپلاستها میزبان مناسبی برای بیان پروتئین نوترکیب در گیاه می باشند. الحاق ژن خارجی در ژنوم کلروپلاست از طریق نوترکیبی همتا بین توالی های lanking در وکتورهای کلروپلاستی با ژنوم کلروپلاست صورت می گیرد. تشخیص نواحی بین ژنی لروپلاستی اولین مرحله در ساخت حامل های کلروپلاستی محسوب می شود. در این تحقیق با استفاده از آنالیزهای بیوانفورماتیکی، نواحی بین ژنی ژنوم های کلروپلاستی به عنوان توای هدف برای الحاق ژن خارجی در ژنوم کلروپلاست انتخاب شد. از آنجایی که شباهت دقیق توالی هدف گیری کننده کلروپلاستی کارایی تراریختی پلاستوم را افزایش می دهد یک جفت پرایمر بر اساس نواحی حفظ شده کلروپلاستی، در گوجه، اسفناج، هویج، کلم و کاهو طراحی شد. به منظور تکثیر نواحی flanking از Long PCR enzyme mix استفاده شد. توالی هدف (4kb) پس از ریکاوری از ژل آگارز در وکتور PGEM-T کلون شد. به منظور تأئید ورود قطعه 4kb از آنزیم Not I استفاده شد. به منظور مشخص کردن سایتهای برشی در قطعات 4kb، وکتورهای نوترکیب برای توالی یابی ارسال شد. این وکتورهای نوترکیب می توانند به عنوان وکتورهای کلروپلاستی اختصاصی برای تولید پروتئین نو ترکیب مورد استفاده قرار گیرند.
Keywords:
Authors
سیدحسین موسوی
مرکز مل ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران
مسعود توحید فر
پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی کرج
سجاد صاریخان
مرکز مل ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران
رضا آذربایجانی
مرکز مل ذخایر ژنتیکی و زیستی ایران