استفاده از رویان های شبیه سازی شده به منظور تولید سلول های بنیادی رویانی در گاومیش

سلول های بنیادی رویانی از لایه زاینده داخلی رویان در مرحله بلاستوسیست تولید می شوند و توانایی تمایز به سلول هایبرون پوست، میان پوست و درون پوست را دارند. در این تحقیق سلول های بنیادی رویانی از بلاستوسیست های حاصل از شبیه سازی به روش (Hand Made Coloning) HMC تولید شدند و کارایی آنها با سلول های بنیادی رویانی حاصل از لقاح آزمایشگاهی مقایسه شدند. از لایه تغدیه کننده به منظور کشت سلول های بنیادی استفاده شد و محیط کشت حاوی knockout serum ،Knockout-Dulbeccoʾs modified Eagleʾs medium basic fibroblast growth factor-2 ،Leukemia Inhibitory Factor ،replacement ال- گلوتامین، اسیدهای آمینه غیر ضروری و جنتامایسین بود. به منظور شناسایی سلول های بنیادی از شناساگرهای سطح سلولی (TRA-1-60 ،SSEA-4 ،SSEA-1 و TRA-1-81) و پلوری پتنسی (SOX2 ،OCT3/4 و NANOG) استفاده شد. نتایج نشان دادند، نرخ رشد سلول های بنیادی حاصل از لقاح آزمایشگاهی بطور معنی داری بیشتر از سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی بود (به ترتیب 120 % در مقایسه با 60 %). با این وجود اختلاف معنی داری در بیان ژنهای SOX2 ،OCT3/4 و C-MYC در نتایج حاصل از real-time PCR بین سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی و لقاح آزمایشگاهی وجود نداشت. اگرچه بیان NANOG در سلول های بنیادی حاصل از شبیه سازی بطور معنی داری افزایش یافت (P<0/05) (به ترتیب 2/01±5/99 در مقایسه با 0±1/0). سلول های بنیادی حاصل از هر دومنشاء قابلیت پلوری پوتنسی خود را برای بیش از دو سال حفظ کردند و به سلول های مختلف از جمله سلول های شبیه به عصبی، پوششی، چربی و عضلانی تمایز یافتند.

Keywords:

سلول های بنیادی رویانی , رویان , شبیه سازی و گاومیش