ساخت سازه یک مونوکلونال آنتی بادی کایمریک علیه CD-25

زنجیره CD25 آلفای گیرنده IL-2 می باشد که برسطح سلولهای B,T فعال شده وجود دارد وبه عنوان یک گیرنده قوی برای IL-2 عمل می کند این مولکول دربیشتر نئوپلاسم های سلول B بیان میشود و همچنین بدلیل حضوربرسطح سلول T میتوان ازآن درجلوگیری ازردپیوندعضواستفاده کردباتوجه به نقش CD25 دراین مطالعه سازه آنتی بادی کایمریک anti-CD25 تولید شده است و عملکرد آن جهت استفاده در کلینیک در آینده بررسی خواهد شدTotal RNAاز هیبریدومایanti-CD25 استخراج وcDNAسنتز شدPCRبا پرایمرهای یونیورسال مناطق متغیر زنجیره های سبک وسنگین انجام وقطعات در وکتورFTکلون گردید. پرایمرهای اختصاصی با استفاده از نتایج تعیین توالی طراحی و قطعات تکثیر شده باpfuبه نواحی ثابت متصل و سازه حاوی زنجیره های سبک و سنگین با استفاده از وکتورpBudCE4.1ساخته شد. نتایجPCRبا استفاده از پرایمرهای یونیورسال برای نواحی متغیر زنجیره های سبک و سنگین باند مورد نظر را نشان داد. قطعات در وکتورFTکلون گردید. نتایج تعیین توالی جهت یافتن بهترین جفت با بالاترین درصد همولوژی( 98 %) درIMGTبررسی گردید. پرایمرهای اختصاصی طراحی و مناطق متغیر تکثیر شده باpfuبه مناطق ثابت زنجیره های سبک و سنگین ملحق گردید. رشته های کامل درpBudCE4.1کلون وسازه جدید تحت عنوانpBudMY8 نامگذاری گردید.با در نظر گرفتن کاربردهای کلینیکی این آنتی بادی، باساخت این سازه وتبدیل نوع موشی آن به کایمریک در راستای کاهش پاسخ ایمنی می توان ایمنی، سمیت و تاثیر آن را بررسی کرد

Keywords:

منوکلونال آنتی بادی , کایمریک , CD25