بررسی ویژگی های سیتوژنتیک یک سلول لاین با منشاء لنفوبلاستوئید گاو

یک سلول لاین با منشاء لنفوبلاستوئید جدا شده از عقده لنفاوی گاو، به طور تجربی حساسیت خود را نسبت به ویروس عامل بیماری طاعون نشخوارکنندگان کوچکPPRVنشان دادPPRیک بیماری مهلک ویروسی شدید با واگیری و انتشار سریع است که عمدتانشخوارکنندگان کوچک را مبتلا می کند که پس از بروز علائمی، درنهایت دام به شدت لاغر شده و تلف می گردد. این بیماری مدتیاست همچون اکثر کشورهای خاورمیانه وارد ایران شده و حتی به مناطق مرکزی ایران هم رسیده است. به جهت اهمیتی که این بیماری دربهداشت، سلامت و اقتصاد دامها می تواند داشته باشد و درمانی برای آن متصور نیست، پیشگیری از بیماری دامها و جلوگیری از توسعهروزافزون آن، جزء اولویتهای سازمان دامپزشکی کشور است. واکسیناسیون بهترین راه حل جهت پیشگیری از شیوع و کنترل این بیماریمی باشد. امروزه، واکسنPPRبا تکثیر سویه واکسینال ویروس روی سلولVeroبسیار زمان و مشکل است. با توجه به اینکه سلول لاین لنفوبلاستوئیدی فوق سوسپانسیون بوده و نسبت به سلولVeroاستفاده از آن در فرآیند تولید واکسن ارجحیت دارد، با انتخاب این سلول جهت تکثیر ویروس علاوه بر حذف روشهای دست و پا گیر کشت منولایر، ویروسی با تیتر بالاتر در حجم های بسیار بالا و در نتیجه با هزینه کمتر و زمان کوتاهتر جهت تولید واکسن حاصل گردید. به منظور جایگزینی یک رده سلولی با رده سلولی دیگر برای تولید محصولات بیولوژیک، رده سلولی جدید بایستی به خوبی شناسایی شود و به اصطلاح Characterized گردد. بنابراین پس از کلون کردن سلول به روشLimit Dilutionو انتخاب حساس ترین کلون نسبت به ویروس نسبت به تعیین ویژگی های سلول فوق اقدام گردیدطبق استاندارد بین المللیTRS878 سازمان بهداشت جهانی برایcharacterizedنمودن یک رده سلولی باید آن را از نظر بقا، هویت، پایداری، عدم آلودگی، خصوصیات رشد، هموژن بودن، تومورزایی سیتوژنتیک و عوامل میکروبی مورد مطالعه و بررسی قرار گیرد. هدف از انجام این پژوهش تعیین ویژگی های سیتوژنتیک سلول فوق، به منظور استفاده از این سلول برای تکثیر انبوه ویروس جهت تولید واکسنPPRاست، که در این راستا سلول کاریوتایپ گردیده و از نظرسیتوژنتیک مورد بررسی قرار گرفت و پایداری ژنتیکی آن طی پاساژهای متوالی به اثبات رسید. همچنین به منظور تعیین هویت سلول واکنشPCRو تکثیر ژن میتوکندریایی اختصاصی گونه انجام شد که منشاء گاوی بودن سلول مذکور را اثبا ت می کرد. همچنین تومورزایی سلول مورد ارزیابی قرار گرفت.

Keywords:

طاعون نشخوارکنندگان کوچک , سلول لنفوبلاستوئیدی , سیتوژنتیک , کاریوتایپ