بررسی مقایسه ای بیان ژنها در دوسویه استافیلوکوک اورئوس مقاوم و حساس به متی سیلین با روشcDNA-AFLP

استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی سیلین یک پاتوژن عمده و مهم در ایجاد بیماریهای ومرگ ومیردر ایران وجهان است.به علت شیوع روز افزون مقاومت به اغلب انتی بیوتیک های رایج به درمان ومقابله با ان بسیارمشکل شده است.هدف از این مطالعه،مقایسه بیان ژنها دردو سویه مقاوم وحساس به متی سیلین باروش مولکولیcDNA- AFLP میباشد.درابتدا با تعیین دو سویه استافیلوکوک اورئوس مقاوم وحساس به متی سیلین با روش باکتریولوژی و لیزدیواره سلولی باکتریها با استفاده ازلیزواستافینRNA،توتال دو سویه استخراج گردید وجهت تهیهcDNA-ازمایشRT-PCRانجام شد.سپسcDNAدو رشته ای شده و مرحلهdigestionبا 2انزیم محدود کنندهmboIوmseI صورت گرفت .سپس اداپتورها که قطعه الیگونوکلئوتیدی مکمل انزیمهای محدود کننده بوده وقطعات برش خورده متصل می گردد.پرایمرهای طراحی شده جهت تکثیر این قطعات دریک نوکلئوتید با اداپتور متفاوت بوده و مرحلهPreamplificationانجامگرفت.جهت اختصاصی بودن قطعات ،پرایمرهای اختصاصی تر مربوط به مرحلهPCR- amplificationانجام گرفت .سپس قطعات تکثیریافته بصورت باندهایی بررویPAGEمختص گردید.نتیجه:تفاوت باندها در دو سویه مقاوم و حساس استافیلوکوک اورئوس بیانگروجود تفاوت در ژنوم استافیلوکوک اورئوس مقاوم به متی سیلین بود .

Keywords:

استافیلوکوکوس اورئوس -مقاومت به متی سیلین , cDNA- AFLP