بذر جو D جداسازی و همسانه سازی راه انداز اختصاصی ژن هوردئین

میزان بیان کم ژنهای خارجی در گیاهان ترانسژنیک فاکتور مهم محدود کننده در مهندسی ژنتیک گیاهان میباشد. به علت فعالیت تنظیمی در نسخهبرداری ژنها، راهاندازها به طور گسترده در سیستم ترانسژنیک گیاهی مورد استفاده قرار گرفته است.استفاده از راهاندازهای قوی همچون راهانداز ویروس موزائیک کلم و یوبی کوئیتین 1 ذرت، در تحقیقات بیوتکنولوژی گیاهی بسیار رایج بوده اما گاهی سطح بیان ژنهای هدف در کلیه بافتها به صورت هدر رفت انرژی گیاه محسوب شده و این امر اصلاًرضایت بخش نیست. استفاده از راهانداز قوی مخصوص بذر، باعث بیان ژنها در بذور شده و چنین مشکلاتی را در بر ندارد. هوردئین بذور جو رایج در کشور میباشد. به این منظور از گیاهک رقم -D هدف از این تحقیق جداسازی راهانداز اختصاصی ژنهوردئین -D رایج آلجر استخراج ژنوم صورت گرفت. با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده تکثیر بخش راهانداز ژن ترانسفورم گردید. در نهایت برای E. coli متصل شده و سپس باکتری pGEMT عملی گردید. قطعه تکثیر یافته در به وکتورو BLAST تایید نهایی، قطعات کلون شده پلاسمیدهای نوترکیب برای توال ییابی فرستاده شدند. نتایج حاصله توسط نرم افزار هوردئین ژنوتیپ آلجر در 98 درصد مناطق -D با توالی های موجود در بانکهای اطلاعاتی مقایسه شدند. راهانداز Clustal w گندم بسیار HMW هوردئین با راه انداز -D دارای 97 در صد شباهت نوکلئوتیدی بود. همچنین نتایج نشان داد که راه انداز مشابه هستند.

Keywords:

E. coli , هوردئین , آلجر -D , راهانداز , ترانسژنیک