بیان آنزیم لیپاز جهش یافته Bacillus thermocatenulatus در مخمر Pichia pastoris GS115

لیپازها از مهمترین آنزیم های صنعتی هستند که کاربردهای وسیع و متنوعی در صنایع مختلف دارند . لیپاز مورد نیاز صنعت، های pH عموماً توسط میکروارگانیسم های گرما دوست تأمین می شود زیرا آنزیم های تولیدی توسط آنها در دماهای بالا و نیز درمربوط به باکتری گرما BTL قلیایی فعالیت خود را حفظ می کنند که این ویژگی ها در صنعت حایز اهمیت می باشند. لیپاز 2 دوست باسیلوس ترموکاتنولاتوس یکی از بهترین نمونه ها ست که هر دو ویژگی فوق را دارا می باشد. به منظور افزایش کارایی این آنزیم جهت تجزیه سوبسترا های بزرگتر، ژن لیپاز با روش جهش زایی هدفمند در محل مشخص جهش داده شد، سپس در وکتور ا نتقال داده شد . در مرحله بعد، بیان GS کلون و با روش الکتروپوریشن به مخمر پیکیا پاستوریس 115 pPICZαB بیانی به خوبی BTL ترشحی لیپاز با افزودن متانول به محیط کشت مخمر القا شد. بررسی ها نشان داد که آنزیم لیپاز جهش یافته 2 توسط مخمر پیکیا پاستوریس بیان و به خارج سلول ترشح می شود. این نتایج نشان می دهد که پیکیا پاستوریس می تواند یک سیستم مطلوب برای بیان بسیاری از پروتئین های نوترکیب در صنعت باشد.

Keywords:

BTL2 , Pichia pastoris , B.thermocatenulatus , لیپاز , بی