ردیابی مولکولی ویروس موزاییک زرد لوبیا و معرفی میزبان جدید آن در استان گیلان

ویروس موزاییک زرد لوبیا (Bean yellow mosaic virus-BYMV) یکی از مهمترین ویروسهای بیماریزا در گیاهان از جمله Potyvirus گیاهان لگومینه محسوب میگردد. این ویروس با پیکرههای رشتهای شکل بطول 750 تا 950 نانومتر عضو جنسبا علائم بدشکلی، زردی برگ، (Trifolium sp.) میباشد. طی سالهای 1389 و 1390 تعداد 135 نمونه شبدر Potyviridae خانواده کوتولگی، پیسک و ابلقی بهمراه تعداد 436 نمونه تصادفی از استان گیلان جمعآوری گردید. این نمونهها از نظر آلودگی به ویروس مورد آزمون قرار گرفتند. تعدادی از نمونه های مثبت در آزمون DAS-ELISA با استفاده از آنتیبادی اختصاصی و به روش BYMV با استفاده BYMV الایزا انتخاب شده و روی گیاهان محک مایه زنی مکانیکی شدند. همچنین آلودگی تعدادی از نمونه ها به ویروس از روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و آغازگرهای اختصاصی طراحی شده برای ناحیه ژن پروتئین پوششی ویروس، مورد بررسی قرار و Chenopodium amaranticolor گرفت. حدود سه تا پنج روز پس از مایهزنی، علائم لکههای موضعی با حاشیه قرمز در ظاهر گردید. بر Vicia faba و P. vulgaris و حدود دو هفته بعد علائم سیستمیک شدن ویروس در گیاهان Phaseolus vulgaris 13 درصد / 27 و 3 / در نمونه های علائمدار و تصادفی بترتیب برابر با 4 BYMV اساس نتایج آزمون الایزا درصد آلودگی به ویروس بود. نتایج حاصل از بررسی محصول پی.سی.آر نشاندهنده تکثیر قطعه دی.ان.ای بطول حدود 900 جفت باز بود که با طول قطعه که در آزمون الایزا BYMV مورد انتظار مطابقت داشت. همچنین بکمک روش پی.سی.آر آلودگی تعدادی از نمونه های شبدر به فاقد واکنش مثبت بودند، تایید گردید. بر اساس نتایج بررسیهای بیولوژیکی، الایزا و آزمون پی.سی.آر آلودگی نمونههای شبدر بهدر گیاه شبدر از کشور بوده و میزبان شبدر BYMV مورد تایید قرار گرفت. این اولین گزارش از ردیابی مولکولی BYMV ویروس برای این ویروس از استان گیلان برای اولین بار در کشور در این تحقیق گزارش میگردد.

Keywords:

ویروس موزائیک زرد لوبیا , واکنش زنجیرهای پلیمراز , ردیابی