بررسی تاثیرات توالی های اینترونی ژن بتا گلوبین انسانی بر بیان فاکتور 9 انعقادی در رده سلولی کلیوی انسان
Publish place: 7th national biotechnology congress of I.R. iran
Publish Year: 1390
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 782
This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI07_0763
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
Abstract:
مقدمه: فقدان و یا نقص در عملکرد فاکتور 9 منجر به بیماری هموفیلی B می گردد. امروزه ژن درمانی و سلول درمانی بعنوان درمان قطعی بیماران هموفیلی مورد توجه قرار گرفته است. با شناسایی توالی های تنظیمی و استفاده از آنها در موقعیت های مناسب در وکتورهای ویروسی یا غیرویروسی می توان در جهت بهبود بیان ژن با هدف ژن درمانی و یا تولید پروتئین نوترکیب اقدام کرد. اینترون ها از جمله توالیهای تنظیمی می باشند که می توانند با روش های متنوعی بر سطوح تنظیمی بیان ژنی در مراحل مختلف موثر باشند. در این پژوهش، 4 وکتور پلاسمیدی نوترکیب فاقد و واحد اینترون های ژن B- گلوبین با روش لیپوفکشن به رده سلولی Hek-293T ترانسفکت گردیدند. هدف: مطالعه سیستماتیک و مقایسه ای تاثیرات توالی های اینتروتی ژن بتا گلوبین بر بیان فاکتور 9 در رده سلولی کلیوی. روش: سازه های ژنی ساخته شده پس از تجهیز به توالی کوزاک و تایید درستی سازه نوترکیب به سلولهای Hek-293T ترانسفکت گردیدند. محیط کشت سلولهای ترانسفکت شده در 3 روز متوالی پس از ترانسفکشن به منظور بررسی بیان فاکتور 9 جمع آوری گردید و توسط آزمون ساندویچ الایزا مورد بررسی قرار گرفت. همچنین جهت بررسی اسپلایسینگ اینترونهای بتا گلوبین از آزمون RT-PCR نیمه کمی استفاده شد. نتیجه: استفاده از اینترون های بتا گلوبین در cDNA فاکتور 9 بیان این پروتئین را کاهش داد این کاهش بیان را می توان با احتمال، به اسپلایسینگ نادرست اینترون های بتا گلوبین در cDNA فاکتور 9 نسبت داد.
Authors
محمد رضا سام
پژوهشکده بیوتکنولوژی دانشگاه ارومیه، ایران،
علیرضا زمردی پور
پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و بیوتکنولوژی، تهران، ایران
علی اکبر حداد مشهد ریزه
پژوهشکده بیوتکنولوژی دانشگاه فردوسی مشهد، ایران
مهدی قربانی
مرکز تحقیقات آسم و آلرژی مرکز طبی کودکان ، دانشگاه علوم پزشکی تهران، ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :