همسانه سازی ژن PVX ویروس بیماری بورس عفونی در وکتور بیانی گیاهی و انتقال آن یه گیاه توتون (Nicotiana tabacum)

بیماری بورس عفونی، بیماری ویروسی مسری و به شدت عفونی، در بین جوجه های جوان است که موجب سرکوب پاسخ های ایمنی می گردد. ویروس دارای پنج پروتئین است، که در بین آنها VP2 ، مهم ترین پروتئین ساختاری کپسید ویروس است. واکسیناسیون اصولی ترین روش کنترل بیماری است. کشاورزی مولکولی، امکان تولید پروتئین های نوترکیب (ایمنی زا، دارویی و ...) را در مقیاس زیاد و در موجودات و سلول های زنده ی اغلب گیاهان و حیوانات اهلی فراهم کرده است. در بررسی حاضر باتوجه به اهمیت پروتئین VP2 در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده، ناحیه ژنی کدکننده پروتئین VPX ، پیش ساز VP2، جهت تولید پروتئین نوترکیب در ناقل بیانی pCAMBIA1304 همسانه سازی شد. پس از هضم آنزیمی، ناقل بیانی و محصول PCR، طی واکنش اتصال، به یکدیگر متصل شده، و با ترانسفورماسیون به روش شوک حرارتی به سلول های مستعد (DH5α) E.coli انتقال داده شد، پس از تایید همسانه سازی، با تکنیک Colony PCR و هضم آنزیمی و توالی یابی، محصول همسانه سازی به روش ذوب و انجماد به اگروباکتریوم و سپس به روش دیسک برگی به گیاه توتون انتقال داده شد، و تراریخته شدن گیاه، با باززایی گیاه تأیید شد.

Keywords:

ویروس بیماری بورس عفونی , پروتئین VPX , پلاسمید Pcambia 1304 , گیاه توتون (Nicotiana tabacum)