بکارگیری رٍوش در تشخیص آلودگی کشتهای سلولی به مایکوپلاسما اوراله

آلودگی کشت های سلولی توسط مایکوپلاسماها یک مساله مهم در فناوری کشت سلولی محسوب می گردد . بنابراین شناسایی و تشخیص آن به منظور جلوگیری از زیان های مهم به دنبال آلودگی با این میکروارگانیسم ها بسیار حائز اهمیت می باشد. هدف این مطالعه راه اندازی و به کارگیری روش واکنش زنجیره پلی مراز به عنوان یک روش سریع، حساس و اختصاصی برای تشخیص مایکوپلاسما اوراله در آلودگی های کشت سلولی و فرآورده های بیولوژیکی بود. با به کارگیری سویه استاندارد مایکلوپلاسما اوراله نسبت به راه اندازی تست PCR با استفاده از جفت پرایمرهای اختصاصی گونه مایکوپلاسما اوراله در ناحیه ژن 16S rRNA اقدام گردید . 62 نمونه ی کشت سلولی مشکوک به آلودگی مایکوپلاسما ارجاعی به آزمایشگاه رفرانس مایکوپلاسما موسسه رازی مورد آزمایش PCR قرار گرفتند . تست PCR راه اندازی شده با DNA مایکوپلاسما اوراله دارای واکنش مثبت بود، در صورتی که مایکوپلاسما سالیواریوم، مایکوپلاسما هیورینیس ، مایکوپلاسما آرژنینی ، آکولوپلاسما لایدلاوی، مایکوپلاسما فرمنتانس ، مایکوپلاسم پنومونیه و همچنین با اشریشیا کلی و استرپتوکوکوس پنومونیه واکنش نداد که نشان داهنده ویژگی بالای این تست بود. از تعداد 62 نمونه کشت سلولی 42 نمونه از نظر جنس مایکوپلاسما و 8 نمونه از نظر گونه مایکوپلاسما اوراله مثبت بودند . با توجه به میزان بالای آلادگی کشت های سلولی به مایکوپلاسما اوراله و ویژگی بالای تست PCR راه انازی شده در این مطالعه ، به کارگیری این روش در تشخیص آلودگی کشت های سلولی توصیه می گردد .

Keywords:

مایکوپلاسما اوراله , PCR , آلودگی , تشخیص مولکولی , کشت سلول