شناسائی اختصاصی تایپ و ساب تایپ ویروس انفلوانزای H7N7 با روش مولکولی RT-PCR

از اولین گزارش شناسایی ویروس انفلوانزای فوق العاده بیماری زای H7N7 در سال 2003 هلند، این ویروس در جمعیت های انسانی و مرغی در کشورهای آسیای شرقی مجدداً بروز نموده به طوری که اخیراً به کشورهای همسایه ایران (هند و پاکستان) نیز رسیده است. با توجه به بروز اپیدمی در کشورهای همسایه ایران و نیز احتمال انتقال آن به داخل کشور، لذا برای تشخیص سریع و جلوگیری از شیوع و گسترش آسیب های جانی و اقتصادی آن، شناسایی اختصاصی تایپ و ساب تایپ ویروس انفلوانزای H7N7 با روش مولکولی RT-PCR در آزمایشگکاه تخصصی ویرومد راه اندازی شد. در این تحقیق با استفاده از پرایمرهای مربوط به ناحیه ای از ژن ماتریکس (M) تایپ A انفلوانزا و همچنین پرایمرهای مربوط به ژن هماگلوتینین (HA) ساب تایپ H7 که مخصوص این ساب تایپ است واکنش RT-PCR انجام گردید که با سنتز DNA مکمل از قطعات مورد نظر (cDNA) از آن به عنوان الگو برای واکنش PCR استفاده شد. قطعات تکثیر شده هدف به طول 100 جفت باز مربوط به ژن های M و HA (قطعات 7 و 5 ژنوم) بر روی ژل آگارز با افزودن اتیدیوم برماید و با استفاده از ترانس ایلومیناتور در طول موج 254 لاندا مشاهده گردید. این مطالعه نشان داد که روش مولکولی RT-PCR برای شناسایی تایپ و ساب تایپ ویروس انفلوانزای H7 روشی مناسب، سریع و کاملاً اختصاصی است.

Keywords:

انفلوانزا , هماگلوتینین , RT-PCR , ساب تایپ