طراحی و بهینه سازی محیط کشت برای رشد بهینه اشریشیا کلی و افزایش تولید استرپتوکیناز نوترکیب

استرپتوکیناز پروتئینی است که به طور طبیعی وسیله بسیاری از سویه های که بتاهمولیتیک خانواده استرپتوکوک تولید شده و به صورت نو ترکیب در میزبان های متفاوتی از جمله اشریشیا کلی برای مصارف دارویی تولید می شود. بیان پروتئین در میزبان ها و شرایط رشد و ترکیبات مختلف محیط کشت متفاوت می باشد. پژوهش حاضر انواع و غلظت های مختلف منابع کربن و نیتروژن برای افزایش تولید پروتئین موتانت SK263cys در میزبان اشریشیا کلی سویه روز به روز تا مورد بررسی قرار گرفت. در تمامی بررسی ها بیان پروتئین نو ترکیب استرپتوکیناز در اشریشیا در شرایط لوله آزمایشی در دمای 37 درجه سانتی گراد و القا توسط IPTG انجام شد. از 3 محیط کشت برای بررسی اولیه میزان تولید پروتئین استفاده شد. محیط کشت M9 بیشترین میزان تولید استرپتوکینازکرد. با در نظر گرفتن محیط M9 به عنوان محیط پایه، تاثیر منابع کربن و نیتروژن مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که گلوکز بیشترین تاثیر در افزایش تولید پروتئین در میان منابع کربنی و تیرپتون بیشترین تولید پروتئین استرپتوکیناز را در میان منابع نیتروژنی را داشته است. استفاده از غلظت های مختلف گلوکز نشان داد که بهترین غلظت برای تولید استرپتوکیناز غلظت 0/5 که نیاز غلظت در صد می باشد. همچنین بیشتر تولید پروتئین در غلظت 1 در صد از تریپتون مشاهده گردید. نتایج نشان داد که بهترین شرایط برای تولید استرپتوکیناز موتانت در اشریشیا کولی سویه روز تا استفاده از محیط کشت M9 با الحاق منبع کربنی گلوکزبا غلظت 0.5% و منبع نیتروژنی با غلظت 1% بیشترین میزان پروتئین حاصل می گردد.

طراحی و بهینه سازی محیط کشت برای رشد بهینه اشریشیا کلی و افزایش تولید استرپتوکیناز نوترکیب Keywords:

استرپتوکیناز , اشریشیاکلی , بیان پروتئین , منبع کربن , منبع نیتروژن