کلون و بیان ژن vp1 ویروس تب برفکی و fliC سالمونلا در باکتری اشرشیاکلای
Publish place: Journal of Veterinary Microbiology، Vol: 13، Issue: 1
Publish Year: 1396
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 409
This Paper With 10 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_JVM-13-1_009
Index date: 9 July 2019
کلون و بیان ژن vp1 ویروس تب برفکی و fliC سالمونلا در باکتری اشرشیاکلای abstract
تب برفکی یک بیماری وزیکولی ویروسی است که منجر به بروز خسارات وسیع در صنعت دامپروری می گردد. امروزه برای کنترل این بیماری از ویروس غیرفعال شده استفاده می شود کهمهمترین نقطه ضعف آن کوتاه بودن طول دوره ایمنی است.لذا تلاش های زیادی در زمینه بکارگیری ادجوانهای موثر تر در فرمولاسیون واکسن صورت گرفته است. هدف از این تحقیق تولید فیوژن پروتئین VP1 ویروس تب برفکی (Opanasia2) و فلاژلین سالمونلا (fliC)به عنوان یک ادجوانت ملکولی استژن 1Dکه مسئول سنتز پروتئین VP1است به طولbp 800 توسط PCR تکثیر داده شد و در وکتور PTZ57 کلون گردید, سپس این وکتور توسط آنزیم هایHindIII و XhoI برش داده شده و در داخل ناقل بیانی pET41b که حاوی ژن فلاژلین سالمونلا بود کلون گردید. پلاسمید نوترکیب به باکتری Escherichia coli(BL21DE3) انتقال داده شد و بیان توسط IPTG(0.5 mM) القا گردید. بیان پروتئین توسطSDS-PAGE در ژل آکریل آمید 12% و وسترن بلات مورد بررسی قرار گرفت. الحاق ژن های vp1و fliCبا استفاده از روش PCR و هضم آنزیمی با دو آنزیم HindIIIو XhoIبا مشاهده باند هایی به طولهای تقریبی bp700 و 1500 تایید گردید. برای خالص سازی از رزین Ni-NTA و گرادیان pH استفاده شد که بیشترین میزان بازیافت پروتئین در5/4 pHمشاهده گردید. بیان پروتئین با مشاهده باند KDa76در آزمایش SDS-PAGE در ژل 12% آکریل آمید ووسترنبلات توسطAntiHis دررسوب باکتریالقاءشده تاییدگردید.با توجه به نتایج به دست آمده ژن فیوژن vp1- fliCsalmonella با طول 2200 bpکلون گردیده و پروتئین حاصل باوزنKDa76با موفقیت بیان و تخلیص گردید.
کلون و بیان ژن vp1 ویروس تب برفکی و fliC سالمونلا در باکتری اشرشیاکلای Keywords:
ویروس تب برفکی- کلون و بیان- ژن vp1
کلون و بیان ژن vp1 ویروس تب برفکی و fliC سالمونلا در باکتری اشرشیاکلای authors
مهرنوش قدیر
گروه میکروبیولوژی, دانشکده علوم, دانشگاه آزاد اسلامی, کرج
سید محمود عظیمی
موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، بخش تب برفکی، کرج
ناصر هرندی
استادیار دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :