استفاده از روش FISH برای تعیین جایگاه دو قطعه تکراری DNA روی کروموزوم ها و رشته های منبسط DNA گونه وحشی Beta Procumbens در گیاهان مونوسومیک با کروموزوم اضافی

محل فیزیکی و ترتیب قرار گرفتن دو قطعه تکراری DNA بنام های OPX2 , PB6-4 خاص گروه Procumbentes روی کروموزوم های گونه وحشی B. Procumbens با استفاده از روش B.Procumbens و یک گیاهان مونوسومیک با کروموزوم اضافی B.Procumbens در مرحله متافاژ استفاده شد. با استفاده از این روش مشخص گردید که پروب PB6-4 عمدتا در ناحیه سانترومر تمام کروموزوم ها قرار دارد، ضمنا تعداد جایگاه های این پروب روی هریک از کروموزوم ها نیز متفاوت است در مقایسه با PB6-4 مشخص شد که پروب OPX2 در طول تمام کروموزوم ها پراکنده بود و تعداد جایگاههای پیوندی آن نیز در هر یک از کروموزوم ها متفاوت است. نتیجه هیبرید همزمان این دو پروب با کروموزوم های میتوزی گیاهان مونوسومیک با کروموزوم اضافی ایجاد علائم فلورسنتی بود که تنها روی یکی از 19 کروموزوم این گیاهان مشاهده گردید که خود نشان دهنده عدم هومولوژی بین این پروب ها و ژنوم B. vulgaris می باشد. تشکیل سیگنالهای فلور سنتی تنها روی یکی از کروموزوم ها این امکان را فراهم آورد تا بتوان ضمن تشخیص کروموزوم اضافه شده از کروموزومهای B. vulgaris الگوی پراکندگی این قطعات تکراری DNA را روی کروموزوم های انفرادی B.Procumbens مشخص و کاریوتایپ این گونه را تعیین نمود. با توجه به اطلاعات موجود در خصوص وجود لینکاژ بین PB6-4  و جایگاه ژنیHsl که مقاومت به نماتد چغندرقند را  کنترل می نماید نتیجه گیری شد که این جایگاه ژنی احتمالا در ناحیه سانترومری کروموزوم یک B.Procumbens شده است کاملا مطابقت دارد. هیبرید پروب PB6-4 با رشته های منبسط (Extended DNA fibers)DNA که از هشت نوع گیاه مونوسومیک اضافه B.Procumbens استخراج شد مشخص نمود که هریک از کروموزوم های بیگانه دارای تعداد متفاوتی از تکرار PB6-4 می باشد، ضمنا تعداد و اندازه توالی های PB6-4 نیز در هر کروموزوم متفاوت است.

Keywords:

روش FISH , DNA , Beta Procumbens , گیاهان مونوسومیک