تولید آزمایشگاهی 100 bp DNA مارکر الکتروفرز
صاحب اثر: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
نوع محتوی: طرح پژوهشی
Language: Persian
استان موضوع گزارش: البرز
شهر موضوع گزارش: کرج
Document ID: R-1056591
Publish: 16 February 2019
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
View: 535
Pages: 40
Publish Year: 1391
نسخه کامل Research منتشر نشده است و در دسترس نیست.
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
Abstract:
سایز مارکرها از قطعات با اندازه مولکولی مشخص تشکیل می گردند که در جریان ژل الکتروفورز در مجاورت قطعه یا قطعات با اندازه نامعلوم رانده می شوند تا امکان تخمین اندازه این قطعات را فراهم نمایند. نمونه های تجاری سایز مارکرها معمولا بر اساس هضم آنزیمی ژنوم فاژ لامبدا تهیه می شوند و علیرغم استفاده گسترده در آزمایشگاه های مولکولار بیولوژی عمدتا از قیمت قابل ملاحظه ای برخوردار می باشند. در مطالعه حاضر یک روش نسبتا ساده و کم هزینه بر مبنای PCR جهت تولید سایز مارکر با قطعات 100 زوج باز شرح داده شده است. بر مبنای ژنوم سویه Bacillus anthracis Sterne 34F2، ده زوج پرایمر جهت تکثیر ده قطعه ژنتیکی به طول دقیقا ،200 100 ، 300 ... و 1000 زوج باز طراحی گردید. اجزا و شرایط PCR به گونه ای تنظیم گردیدند که هر 10 واکنش PCR به صورت همزمان و بر اساس یک پروتکل اجرا گردیدند. محصولات ده گانه PCR جهت اطمینان از اندازه تعیین توالی نوکلیوتید گردیدند. مقادیر مختلف از محصولات PCR تهیه و پس از خالص سازی تجمیع گردیدند. کمیت های تلفیقی مختلف اجزا سایز مارکر ابداعی در مقایسه با نمونه های تجاری مشابه بررسی گردید. یافته های مقدماتی کیفیت نسبتا مطلوب این محصول را با توجه به هزینه اندک و روش ساده تهیه آن نشان دادند اما تعیین میزان پایداری و تثبیت مقادیر کمی و کیفی اجزا این سایز مارکر احتیاج به مطالعه و کار بیشتر خواهد داشت. کلمات کلیدی: DNA size marker - PCR - Loading buffer - Electrophoresis - 100 bp