طراحی یک روش الیزا جهت تعیین پتانسی سرم ضد مار

بررسی پتانسی سرم های ضد مار یکی از عوامل آزمایشگاهی مهم جهت تایید سرم تهیه شده برای خنثی سازی سم مار یا سموم مار های مورد نظر می باشد. توانایی خنثی سازی سموم مار معمولا با روش بیولوژیک ‭invivo lethality assay ‬با نام ‭(minimum effective dose) ED‬‮‭50‬ انجام می شود در این تحقیق تلاش شده که یک روش الیزای رقابتی طراحی گردد تا بتواند بصورت ‭(invitro) ‬پتانسی سرم ضد مار را اندازه گیری نماید و در نهایت نتایج هردو روش مقایسه شده است. مقدار‭LD‬‮‭50‬ این سم در موش 6‭/g‬5تعیین شد. برای خنثی سازی سم یاد شده از روش سنجش ایمنی آنزیمی (الایزا) رقابتی و سنجش بیولوژیک ‭ED‬‮‭50‬ استفاده شد. هر دو نوع این تستها برای تخمین قدرت سرم در روی ‮‭15‬ نمونه که از اسبهای هایپر ایمن گرفته شده بود ، انجام شد. نتایج آزمایش الایزای رقابتی برای تعیین قدرت سرم ضد مار نشان دادکه رقت ‮‭1/12000‬ سرمی در این سیستم برای مهار حدود ‮‭50‬ درصد، مناسب است . دوز چالش5 ‭LD‬‮‭50‬ سم برای تست خنثی سازی کشندگی برای همه سرمها انتخاب گردید. الایزای رقابتی با سنجش بیولوژیکی رایج ‭ED‬‮‭50‬ مورد مقایسه قرار گرفت. همبستگی معناداری بین تیترصهای الایزا و مقادیر‭ED‬‮‭50‬ در سطح معناداری ‮‭0/01‬ ‭P ‬و‮‭0/95‬‭=r ‬مشاهده گردید، که نشان میدهدکه روش مورد مطالعه در این پژوهش در شرایط برون تن میتواند ظرفیت خنثی سازی آنتی بادیهای سرم را همانند سنجش بیولوژیک(درون تن) با دقت بالا تخمین بزند. نتایج پژوهش حاضر نشان میدهد الایزایی که کمپلکس آنتی ژن- آنتی بادی را اندازه میگیرد میتواند جایگزین مناسبی برای سنجش خنثی سازی کشندگی در محیط بیولوژیک در موشها باشد.