کلون و بیان قطعه S1 پرتوسیس توکسین در باکتری E.coli و ارزیابی ایمنی زایی آن در مدل موشی.
صاحب اثر: سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی
نوع محتوی: طرح پژوهشی
Language: Persian
استان موضوع گزارش: البرز
شهر موضوع گزارش: کرج
Document ID: R-1059235
Publish: 16 February 2019
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
View: 255
Pages: 73
Publish Year: 1390
نسخه کامل Research منتشر نشده است و در دسترس نیست.
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
Abstract:
بردتلا پرتوسیس باکتری گرم منفی و عامل بیماری سیاه سرفه در دستگاه تنفسی انسان است . پرتوسیس توکسین مهمترین آنتی ژن این باکتری در ایجاد پاتوژنیسیته و ایجاد محافظت بوده و زیر واحد S1 مهمترین زیرواحد این توکسین است. در این مطالعه برای بیان مهمترین زیر واحد پرتوسیس توکسین، پس از تکثیر ژن S1، وکتور های بیانی pAED4 pET- 22b(+)، pET-28a، pET-14b، حاوی ژن S1 به باکتری اشرشیا کلی (DE3) BL21 و (plys s) BL21 (به عنوان میزبان بیانی) ترانسفورم گردید تا rS1 بیان گردد. بهترین نتیجه در وکتور pET- 22b(+) و میزبان (DE3) BL21 بدست آمد. پروتیین بیان شده توسط وسترن بلات کنترل گردید. نتایج نشان دهنده آن است که پروتیین بیان شده31 و 28 کیلو دالتونی همان پروتیین S1 همراه و یا بدون قطعه leader peptide می باشد. تزریق زیر جلدی rS1 به همراه ادجوانت فروند به عنوان و همچنین گروههای کنترل) ادجوانت و واکسن سلولار ساخت موسسه رازی) به موشها باعث تولید آنتی بادی های IgG کل و IgG2a و همینطور افزایش IFN- شد که نشان گر فعالیت بیشتر سلولهای وابسته به Th1 و سیستم ایمنی سلولی بود.مثبت بودن وسترن بلات و افزایش تیتر آنتی بادی IgG کل نشان دهنده ایمونوژن بودن rS1 است. ارزیابی توانمندی گروه های موشی تزریق شده به روش کندریک نشان دهنده این بود که rS1 دارای قدرت محافظت کنندگی نیست ونیاز به همراهی آنتی ژنهای دیگر پرتوسیس دارد. نتایج این مطالعه نشان داد که می توان پروتیین rS1 را به صورت تنها به عنوان آنتی ژن در کیت های تشخیصی (مانند الایزا) و یا به صورت ترکیبی به همراه ادجوانت مناسب و آنتی ژنهای دیگر مثل FHA FIM، ACT ، PRN در واکسن آسلولار ضد پرتوسیس استفاده کرد. کلمات کلیدی: پرتوسیس توکسین، پروتیین ،S1 ارزیابی ایمنی