تاثیر یونهای فلزی بر فعالیت و پایداری آنزیمهای پیرازینآمیداز نوع وحشی و جهشیافته
Publish place: Biological Journal of Microorganisms، Vol: 5، Issue: 18
Publish Year: 1395
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 327
This Paper With 15 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_BJM-5-18_014
تاریخ نمایه سازی: 12 اردیبهشت 1400
Abstract:
مقدمه: پیرازینآمیداز یک متالوآنزیم مونومری با فعالیت هیدرولازی است و مسئول تبدیل داروی ضدسل پیرازینآمید به شکل فعالش یعنی پیرازینوئیک اسید است. جایگاه اتصال به فلز در آنزیم پیرازینآمیداز مایکوباکتریوم توبرکلوزیس حاوی یک آسپارتیک اسید (آسپارتیک اسید۴۹) و سه هیستیدین (هیستیدین ۵۱، هیستیدین۵۷ و هیستیدین۷۱) است. بروز جهش در ژن پیرازینآمیداز (pncA) مسوول اصلی مقاومت پیرازینآمیدی است و میتواند جایگاه اتصال به فلز را تغییر دهد. ازاینجهت، بررسی تاثیر یونهای فلزی مختلف بر فعالیت و پایداری آنزیم پیرازینآمیداز نوع وحشی و جهشیافته میتواند مهم باشد. مواد و روشها: در این مطالعه ناقل بیانی حاوی ژن پیرازینآمیدازهای نوع وحشی و جهشیافته به اشرشیا کلی سویه BL۲۱ منتقل شد سپس پروتئینهای نوترکیب بیان و تخلیص شدند. میزان تخلیص با روش الکتروفورزSDS-PAGE ارزیابی شد؛ سپس فعالیت و پایداری آنزیمهای خالصشده در حضور غلظت یک میلیمولار از یونهای دوظرفیتی نیکل (Ni۲+)، آهن (Fe۲+) و منگنز (Mn۲+) بررسی شد. نتایج: بررسی ژل حاصل از الکتروفورز SDS-PAGE نشان داد که آنزیمهای بیانشده، خالص شدهاند. بررسی فعالیت و پایداری در حضور فلزات نشان داد که نیکل باعث افزایش فعالیت و پایداری آنزیمهای نوع وحشی و جهشیافتهها (جهشیافته ۱: L۱۵۱S و جهش یافته ۲ (سهگانه): A۱۴۳T/T۱۶۸A/E۱۷۳K) شد. آهن باعث کاهش فعالیت و پایداری جهشیافته ۱ شد؛ اما بر سایر آنزیمها تاثیر چشمگیری نداشت. منگنز باعث کاهش فعالیت و پایداری آنزیمها شد. بحث و نتیجه گیری: یون نیکل نسبت به یونهای آهن و منگنز میانکنشهای مساعدتری با جایگاه اتصال به فلز در پیرازینآمیداز نوع وحشی و جهشیافتهها برقرار کرد و بنابراین باعث افزایش فعالیت و پایداری آنزیمها شد.
Keywords:
مایکوباکتریوم توبرکلوزیس , پیرازینآمیداز , مقاومت به پیرازین آمید , جایگاه اتصال به فلز , فعالیت و پایداری
Authors
مهرنوش صفرزاده
دانشجوی کارشناسی ارشد زیستشناسی سلولی و مولکولی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
محمد پاژنگ
استادیار بیوشیمی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
فرامرز مهرنژاد
استادیار بیوفیزیک، دانشگاه تهران، تهران، ایران
فرحنوش دوستدار
استادیار میکروبیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران
نادر چاپارزاده
دانشیار فیزیولوژی گیاهی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
داود ربیعی فرادنبه
دانشجوی کارشناسی ارشد زیستشناسی سلولی و مولکولی، دانشگاه شهید مدنی آذربایجان، تبریز، ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :