تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سویه اوریگامی اشریشیاکلی و مقایسه میزان استخراج آن با دو روش اولتراسونیک و انجماد و ذوب
Publish place: Biological Journal of Microorganisms، Vol: 4، Issue: 14
Publish Year: 1394
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 430
This Paper With 13 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_BJM-4-14_014
Index date: 1 May 2021
تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سویه اوریگامی اشریشیاکلی و مقایسه میزان استخراج آن با دو روش اولتراسونیک و انجماد و ذوب abstract
مقدمه: هورمون رشد انسانی یک پروتئین تکرشته است که دارای ۱۹۱ اسیدآمینه و وزن مولکولی حدود ۲۲ کیلودالتون است. به علت فعالیتهای زیستی مهم و متنوع هورمون رشد، این هورمون دارای کاربردهای گستردهایی در پزشکی و بیوتکنولوژیست. از اواخر سال ۱۹۷۰ استفاده از بیان ژن برای تولید پروتئینهای نوترکیب صنعتی تبدیل به یک صنعت چند میلیارد دلاری شده است. از طرفی مشکلاتی که در استخراج پروتئین درونسلولی وجود دارد باعث شده است که چندین روش برای این کار ارایه شود که در بسیاری از این روشها نیاز به تجهیزات خاص است. اما در بیشتر مطالعات، پژوهشگران نیاز به یک روش سریع و ارزان قیمت برای تخریب سلول دارند. هدف این پژوهش، تولید هورمون رشد انسانی توترکیب و مقایسه میزان استخراج آن با روش انجماد و ذوب و روش اولتراسونیک در سویه اوریگامی اشریشیاکلی است. مواد و روشها: سلولهای مستعد سویه اوریگامی اشریشیاکلی با وکتور حاوی ژن هورمون رشد انسانی ترانسفورم شده و با کشت در محیط LB و القا با IPTG هورمون رشد انسانی نوترکیب تولید و با دو روش انجماد و ذوب و اولتراسونیک، استخراج و سپس این پروتئین با استفاده از روشهای الایزا، برادفورد، داتبلات و وسترنبلات بررسی شد. نتایج: عمل ترانسفورم کردن باکتری با کارایی بالایی انجام گرفت و نتایج حاصل از داتبلات و وسترنبلات نشان داد که پروتئین هورمون رشد انسانی نوترکیب به خوبی تولید شد. با استخراج پروتئین با روشهای انجماد و ذوب و اولتراسونیک و بررسی نتایج حاصل از روشهای الایزا و برادفورد مشخص شد که میزان پروتئین استخراج شده در روش انجماد و ذوب آهسته بیشتر از انجماد و ذوب سریع و کمابیش هم اندازه پروتئین استخراج شده در روش اولتراسونیک است. بحث و نتیجهگیری: برابر بودن میزان پروتئین استخراج شده در روش انجماد و ذوب آهسته و روش اولتراسونیک نشان دهنده این است که روش انجماد و ذوب آهسته، در مواردی که امکان استفاده از تجهیزات خاص و گرانقیمت مثل اولتراسونیک وجود ندارد، جایگزین مناسبی برای این روش است.
تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سویه اوریگامی اشریشیاکلی و مقایسه میزان استخراج آن با دو روش اولتراسونیک و انجماد و ذوب Keywords:
تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سویه اوریگامی اشریشیاکلی و مقایسه میزان استخراج آن با دو روش اولتراسونیک و انجماد و ذوب authors
مرضیه سواری
کارشناسی ارشد میکروبیولوژی، دانشگاه اصفهان، ایران
سیدحمید زرکش اصفهانی
دانشیار ایمونولوژی، دانشگاه اصفهان، ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :