تهیه آزمایشگاهی وکتور T/A برای تسهیل همسانه سازی قطعات DNA حاصل از PCR
Publish place: Journal of agricultural biotechnology، Vol: 5، Issue: 2
Publish Year: 1392
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 348
This Paper With 13 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_JOAGK-5-2_011
Index date: 4 October 2021
تهیه آزمایشگاهی وکتور T/A برای تسهیل همسانه سازی قطعات DNA حاصل از PCR abstract
امروزه مهندسی ژنتیک جزء اجتناب ناپذیر پژوهشهای زیست شناسی نوین میباشد و همسانهسازی به عنوان یکی از اصلیترین بخشهای این علم، کاربرد گستردهای دارد. پلاسمیدها یکی از پرکاربردترین حاملها میباشند که امکان تکثیر ژن مورد نظر را به صورت نامحدود در میزبان عمدتا" باکتریایی فراهم میکنند. وکتورهای T/A نوعی از حاملهای پلاسمیدی میباشند که امکان همسانهسازی قطعه دیانای تکثیر شده با آنزیم Taq DNA polymerase (در واکنش زنجیرهای پلیمراز) را تسهیل می کنند. با توجه به محدودیت امکانات، خرید کیت همسانهسازی حاوی این پلاسمید ممکن است به سختی میسر باشد. به همین جهت تهیه این وکتور با کارایی خوب در آزمایشگاه حائز اهمیت است. در این پژوهش، بعد از تهیه سلول های مستعد (رقیب) از باکتری Escherchia coli، پلاسمید حلقوی و فاقد قطعه خارجی pTZ۵۷R به این سلولها ترانسفورم گردید. پس از استخراج پلاسمید به روش لیزآلکالینی، با آنزیم EcoRV پلاسمید برش داده شده و خطی گردید. سپس آنزیم برشی غیرفعال گردید و نوکلئوتید تیمین به انتهای آزاد این پلاسمید خطی اضافه شد. سپس کارایی حامل تهیه شده طی واکنش اتصال دیانای به پلاسمید و متعاقب آن، ترانسفورماسیون باکتری تایید گردید. بعلاوه، بخشی از ژنوم پوتیویروس که با جفت آغازگر یونیورسال مورد تکثیر قرار گرفته بود در پلاسمید ساخته شده مورد همسانه سازی وترادف یابی قرار گرفت که در مقایسه با توالیهای همقطار موجود در پایگاه ژن بانک بعنوان ویروس موزائیک سویا تشخیص داده شد.
تهیه آزمایشگاهی وکتور T/A برای تسهیل همسانه سازی قطعات DNA حاصل از PCR Keywords:
تهیه آزمایشگاهی وکتور T/A برای تسهیل همسانه سازی قطعات DNA حاصل از PCR authors
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :