طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV) با استفاده از وکتور EGFP-N۱
Publish Year: 1395
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 51
This Paper With 9 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JMUMS-26-137_003
تاریخ نمایه سازی: 2 آبان 1402
Abstract:
سابقه و هدف: در این پروژه، هدف کلی تحقیق طراحی و ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی (HIV-۱) با استفاده از وکتور pEGFP-N۱ بود. کلونینگ ژن Vpr قبلا درون وکتور pEGFP_N۱ صورت نگرفته بود.
مواد و روش ها: وکتور pUC۱۹ دارای ژن تمام طول Vpr جهت تایید با استفاده از آنزیم های محدود کننده برش داده شد. سپس جهت اضافه کردن سایت های برش آنزیمی (XhoI, KpnI) در ژن مورد نظر مطابق با سایت های موجود در وکتور pEGFP-N۱ با طراحی پرایمر واکنش PCR بر روی ژن Vpr با استفاده از پلاسمید نوترکیب pUC۱۹-Vpr به عنوان الگو انجام گرفت. محصول پس از الکتروفورز، مورد استخراج از ژل قرار گرفته و تخلیص گردید. سپس هر دو محصول PCR و وکتور pEGFP-N۱ تحت واکنش هضم آنزیمی قرار گرفتند. در مرحله بعد، واکنش الحاق توسط آنزیم T۴ انجام گرفت و این ژن به درون وکتور pEGFP-N۱ کلون شده و به درون باکتری DH۵a ترنسفورم گردید. در نهایت سازه استخراج شده و با هضم آنزیمی و PCR مورد تایید قرار گرفت.
یافته ها: در این پروژه ابتدا ژنVpr درون وکتور pUC۱۹ پس از برش آنزیمی مورد تایید قرار گرفت. سپس این ژن به طور تمام طول و با قرار دادن توالی های برش از ۲ آنزیم محدودالاثر در طراحی پرایمرهای اختصاصی در واکنش PCR تکثیر داده شد و اندازه محصول در الکتروفورز مورد تایید قرار گرفت. محصول واکنش الحاق ژن Vpr به طور تمام طول در وکتور pEGFP-N۱ نیز هم در هضم آنزیمی و هم در PCR مورد تایید قرار گرفت.
استنتاج: ساخت وکتور نوترکیب واجد ژن تمام طول Vpr ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی با استفاده از وکتور pEGFP-N۱ با موفقیت انجام گرفت.
Keywords:
Human Immunodeficiency Virus-۱ , Vpr gene , pEGFP-N۱ , ویروس نقص ایمنی اکتسابی انسانی , ژن Vpr , وکتور pEGFP-N۱
Authors
مائده رمضان پور
MSc Student in Genetic, Faculty of Biology, Islamic Azad University, Tehran Medical branch, Tehran, Iran
پونه رحیمی
Associate Professor, Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
مهرداد هاشمی
Associate Professor, Department of Biology, Faculty of Biology, Islamic Azad University, Tehran Medical branch, Tehran, Iran
سیدمهدی سادات
Assistant Professor, Department of Hepatitis and AIDS, Pasteur Institute of Iran, Tehran, Iran
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :