طراحی، ساخت و تایید مولکولی سازه جفتی بیان کننده ژن MaSp۱ و بیان گذرای آن در الیاف پنبه
Publish place: Nova Biologica Reperta، Vol: 3، Issue: 3
Publish Year: 1395
Type: Journal paper
Language: Persian
View: 137
This Paper With 11 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- I'm the author of the paper
Export:
Document National Code:
JR_NBR-3-3_007
Index date: 29 November 2023
طراحی، ساخت و تایید مولکولی سازه جفتی بیان کننده ژن MaSp۱ و بیان گذرای آن در الیاف پنبه abstract
پنبه L.) Gossypium hirsutum) از محصولات مهم زراعی دنیا است و افزایش کیفیت الیاف آن از اهمیت فراوانی در صنایع نساجی برخوردار است. رشته های تار عنکبوت محکمترین و کشسانترین الیاف شناخته شده در طبیعت است. بدین جهت سازهای طراحی شد تا با بیان ویژه پروتئین تار عنکبوت در الیاف پنبه منجر به افزایش کیفیت آن جهت ریسندگی شود. پس از سنتز سازه موردنظر که ترکیبی از پروموتر ویژه بیان در فیبر پنبهRD۲۲-like۱ ، توالی کوزاک مانند در گیاهان و توالی مصنوعی براساس ژن Lh Major ampullate Spidroin۱ (MaSp۱) بود، پلاسمید مورد نظر توسط دو آنزیم EcoRI و NheI برش دوگانه داده شد و پس از استخراج قطعه موردنظر بین جایگاه های برش EcoRI و NheI دروکتور باینری pCAMBIA۱۳۰۴ همسانه سازی شد. پس از تراریختی E.coli DH۵ α توسط این پلاسمید و استخراج آن، پلاسمید جدید pCSP نامگذاری شد. با واکنش زنجیرهای پلیمراز توسط پرایمر اختصاصی ژن مورد نظر و ژن مقاومت به هیگرومایسین و همچنین برش آنزیمی دوگانه صحت واکنش اتصال به تایید رسید. پس از تراریختیAgrobacterium tumefaciens LBA۴۴۰۴ توسط pCSP، صحت تراریختی با واکنش زنجیرهای پلیمراز تایید شد. سپس تخمک پنبه رقم ورامین توسط آن ترایخته شد و با اثبات بیان ژن MaSp۱ در تخمک و الیاف پنبه در محیط در شیشه مشخص شد پروموتر GaRDL۱ که متعلق به گونه دیگری از پنبه است بهخوبی توان کنترل بیان ژن مورد نظر در الیاف پنبه را دارد و توالی ژن سنتزی بدون بهینهسازی کدون در الیاف پنبه قابل بیان میباشد.
طراحی، ساخت و تایید مولکولی سازه جفتی بیان کننده ژن MaSp۱ و بیان گذرای آن در الیاف پنبه Keywords:
spidroin , ovule , transformation , double digestion , promote , اسپایدرویین , تخمک , تراریختی , برش دوگانه , پروموتر
طراحی، ساخت و تایید مولکولی سازه جفتی بیان کننده ژن MaSp۱ و بیان گذرای آن در الیاف پنبه authors
Maryam Behnam
دانشگاه پیام نور تهران شرق
Seyed Javad Davarpanah
دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله
Ramin Karimian
دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :