سنتز و بررسی اثرات ضد قارچی آنالوگی از فلوکونازول، مشتق شده از دی تیوکاربامات

سابقه و هدف: از میان دسته های مختلف داروهای ضد قارچ، ضد قارچ های آزولی به دلیل گستره عملکردی، قدرت اثر بالا و داشتن آنزیم هدف مشخص، بیش تر مورد توجه قرار گرفته اند. فلوکونازول یکی از این داروها است که به عنوان یک بیس- تریازول و به عنوان اولین داروی تریازولی، وارد بازار گردید. داروهای نسل جدید ضد قارچی مانند آلباکونازول و ووریکونازول با استخلاف یکی از حلقه های تریازول فلوکونازول با هتروسیکل های دیگر به وجود آمده اند. بر همین اساس، در این تحقیق مشتق جدیدی از فلوکونازول که در آن یک بازوی تریازولی فلوکونازول با ۴- بنزیل پیپرازین دی تیوکاربامات جایگزین شده است، سنتز گردید و اثرات ضدقارچی آن مورد ارزیابی قرار گرفت. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، ترکیب نهایی موردنظر(۶) از واکنش دو حد واسط کلیدی اکسیران و N-بنزیل پیپرازین در حلال اتانول و در مجاورت کربن دی سولفید و تری اتیل آمین به دست آمد. به منظور تهیه مشتق اکسیران، از واکنش ترکیب کتونی با نام شیمیایی ۱-(۲، ۴-دی فلوروفنیل)-۲-(H۱-۱، ۲، ۴-تریازول-۱-ایل) اتان-۱- اون با تری متیل سولفوکسونیوم یدید استفاده گردید. در مسیر دیگر و برای سنتز N- بنزیل پیپرازین، ابتدا بنزیل کلراید به همراه پیپرازین در حلال اتانول رفلاکس شد و طی حمله نوکلوفیلی یکی از اتم های نیتروژن پیپرازین مونوبنزیله گردید. لازم به ذکر است خالص سازی ترکیبات با روش های رایج استخراج و تبلور مجدد انجام شده و نیازی به کروماتوگرافی نمی باشد. ساختار ترکیب نهایی به دست آمده توسط طیف های مادون قرمز(IR) و رزونانس مغناطیسی هسته ای (NMR) و طیف سنجی جرمی (MS) تایید گردید. بررسی فعالیت ضد قارچی ترکیب سنتز شده در مقایسه با فلوکونازول بر علیه چندین گونه از قارچ های پاتوژن حساس به فلوکونازول شامل کاندیدا آلبیکنس، کاندیدا گلابراتا، کاندیدا پاراپسیلوزیس، کاندیدا کروسی، و کاندیدا تروپیکالیس، و هم چنین ایزوله های مقاوم به فلوکونازول انجام گرفت و حداقل غلظت مهارکننده رشد(MIC) به وسیله روش Broth Micro-dilution به صورت  In vitroتعیین گردید. علاوه بر این، اثر همولیتیک روی گلبول های قرمز و سمیت سلولی روی سلول های HepG۲ برای این ترکیب بررسی شد. نحوه داکینگ ترکیب مورد نظر با آنزیم لانوسترول α۱۴-دمتیلاز(CYP۵۱) هم مورد مطالعه قرارگرفت. یافته ها: بررسی اولیه اثرات ضدقارچی روی ۱۰ قارچ حساس به فلوکونازول نشان داد که ترکیب سنتز شده با مقادیرMIC بین ۰/۰۶۳ تا ۱ میکروگرم بر میلی لیتر از اثرات ضدقارچی بسیاری قویی روی کاندیدا آلبیکنس، کاندیدا گلابراتا، کاندیدا پاراپسیلوزیس، کاندیدا کروسی و کاندیدا تروپیکالیس برخوردار است. به طور کلی، اثرات ضدقارچی آن ۴ الی ۶۴ برابر فلوکونازول بود. هم چنین این ترکیب پروفایل ضد کاندیدایی خوبی را در برابر گونه های مقاوم به فلوکونازول نشان داد در حالی که مقادیر MIC فلوکونازول در برابر ایزوله های کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا کروسی معادل یا بیش تر از ۶۴ میکروگرم بر میلی لیتر بود. ترکیب ۶ به طور موثری از رشد کاندیدا آلبیکنس و کاندیدا کروسی مقاوم به فلوکونازول در غلظت های ۸ یا ۱۶ میکروگرم بر میلی لیتر جلوگیری کرد. مقدار MIC این ترکیب در برابر کاندیدا پاراپسیلوزیس معادل ۵/۰ میکروگرم بر میلی لیتر بود. انجام آزمون های همولیز و سمیت سلولی هم نشان داد که این ترکیب به اندازه فلوکونازول برای سلول های انسانی ایمن و بدون آزار است. مطالعه داکینگ نشان داد که ترکیب طراحی شده به واسطه دارا بودن بخش بنزیل پیپرازین دی تیوکاربامات می تواند ارتباط موثرتری با آنزیم لانوسترول α۱۴-دمتیلاز برقرار نماید. استنتاج: با توجه به نتایج به دست آمده، ترکیب سنتز شده در این مطالعه، کاندید مناسبی برای انجام تست های in vivo و بقیه آزمون های پیش بالینی و فارماکوکینتیکی در راستای کشف داروی جدید ضد قارچ می باشد.

سنتز و بررسی اثرات ضد قارچی آنالوگی از فلوکونازول، مشتق شده از دی تیوکاربامات Keywords:

antifungal azoles , fluconazole , dithiocarbamate , antifungal activity , lanosterol ۱۴α-demethylase , آزول های ضد قارچ , فلوکونازول , دی تیوکاربامات , اثر ضدقارچی , لانوسترول α۱۴- دمتیلاز