جداسازی و شناسایی ترکیب فلورسانس از کشت سلولی زیره سیاه (Bunium persicum)

ترکیبات فلورسانس دارای کاربردهای زیادی در صنایع غذایی، پزشکی و محیط زیست م یباشند. هدف از این تحقیق جداسازی و شناسایی ترکیب فلورسانس یافت شده در فرَآیند کشت سوسپانسیون Bunium persicum بود. برای جداسازی و خال صسازی آن، پس از استقرار کشت سلولی در محیط کشت MS مایع، مقدار 100 گرم سلول خشک را در 100 میلی لیتر دی کلرومتان خرده کرده و پس از صاف کردن و تغلیظ با روتاری درون ستون کروماتوگرافی ریخته شد. از دو حلال هگزان و اتیل استات با نسبت های مختلف 8:2 ، 6:4 ، 4،6 ، 2:8 برای جداسازی ترکیبات مختلف استفاده گردید، که مرحله به مرحله افزوده شدند. پس از خروج ترکیب فلورسانس از ستون، از روش Preparative TLC برای خلوص بیشتر استفاده شد. ترکیب بر روی صفحه TLC قرار گرفت و سپس در مخلوطی از دو حلال د یکلرومتان و متانول با نسبت 1:9 قرار داده شد. پس از جداسازی ترکیب فلورسانس، از صفحه TLC تراشیده و در حلال د یکلرومتان حل شد. به منظور شناسایی این ترکیب از H-NMR 1 استفاده گردید. نتایج TLC نشان داد که این ماده در سایر اندا مهای گیاهی دیده نمی شود و تنها در سلو لها وجود دارد و مقداری از آن به درون محیط کشت آزاد می شود. وجود این ترکیب در حلال دی کلرومتان شاخص تر از سایر حلال ها بود. نتایج H-NMR1 آن نشان داد که این ترکیب یکی از مشتقات کومارین است ( 6- متوکسی 7- هیدروکسی کومارین) و فرمول مولکولی آن C9H5O4Me می باشد.

Keywords:

TLC , NMR , Bunium persicum ترکیب فلورسانس , کشت سوسپانسیون سلولی