بررسی خاصیت آپوپتوزی نانو ذره نقره سنتز شده به روش سبز از گیاه Moringa olifera بر بیان ژن MLH۱علیه رده سلولی سرطان کلورکتال abstract
مقدمه ژن (Mult homolog۱)MLH۱ عنصر اصلی هترودایم Multlα بوده و در ترمیم عدم تطابق باز- باز و لوپ حذف و اضافه نقش دارد. هنگاهی که پروتئین MLH۱ حضور ندارد،تعداد خطاهایی که تعمیر نشده باقی میمانند، افزایش مییابد و این مهم میتواند منجر به ایجاد تومور در بدن شود. سرطان کلورکتال سومین نوع شایع سرطان از نظر بروز و سومین نوع سرطان از نظر مرگ و میر درسراسر جهان گزارش شده است در این راستا، پژوهش حاضر با هدف بررسی اثر نانوذره نقره زیستی برخواص ضد سرطانی و بیان ژن MLH۱ در نمونه سلول سرطانی افراد مبتلا به سرطان کلورکتال انجام شد .مواد و روشها :در این مطالعه سنتز سبز نانوذرات نقره از روش رسوب گذاری با احیای یون های نقره توسط توسط عصاره گیاه مورینگا الیفرا انجام گرفت . سپس ، نانوذرات نقره بااستفاده اده از طیف سنجی مرئی فرابنفش ، میکروسکوپ الکترونی گذاره و روبشی تایید شدند. اثرات سمیت سلولی نانو ذرات بر روی سلول ها با روش رنگ سنجی MTT طی ۴۲ ساعت مورد ارزیابی قرار گرفت . پس از استخراجRNA سلولهای تیمار شده و سنتز cDNA و پرایمرها به روش Exon-Exon Junction طراحی شد و آزمون Real-time Polymerase برای ژن های وMLH۱ و Beta-actin به صورت سه بار تکرار انجام شد. آنالیز نهایی نتایج با استفاده از نرم افزار گراف پد پریسم و Rest ۲۰۰۹ صورت گرفت .یافته ها: وجود پیک در طول موج ۲۳۴نانومتر برای نانو ذرات نقره سنتز شده با آنالیز طیف سنجی مرئی فرا بنفش تایید شد.مطالعه ریخت شناسی روی اندازه و شکل نانو ذرات نقره نشان داد که نانو ذرات شکل کروی داشته و اندازه ای بین ۴۰ تا ۳۴نانومتر قطر دارند. نتایج MTT نشان داد که اثر ضد تکثیری نانو ذرات بستگی به غلظت نانو ذره نقره سنتز شده دارد. تیمار رده سلولی سرطانی MLH۱ و نرمال با نانو ذرات سنتز شده در غلظت ۰۴۴ میکرو گرم در میلی لیتر در مدت ۴۲ ساعت بررسی اثرات سمیت سلولی نشان داد، درصد مرگ سلولهای سرطانی تحت تاثیر کوئرستین موجود در نانو ذره زیستی سبز مورینگا وابسته به غلظت و زمان بوده و این تفاوت از نظر آماری نسبت به گروه کنترل معنی دار۰۵/۰ )P < است . ببه طوری که دوزکشنده عصاره برای %۵۰زنده مانی IC۵۰ در بازهی زمانی ۴۸ ساعته برای سلولهای سرطانی روده برابر با ۱۳.۲۲ g/ml بدست آمد.و نسبت بیان ژن MLH۱در بافت تومور به بافت سالم مجاور آن افزایش بیان داشته داشته است .( .( ۰۵.۰.(P≤