انتقال ژن پروتئین بازدارنده پلی گالاکتوروناز 1 (عامل مقاومت به برخی از بیماری های قارچی در سیب) به باکتری Agrobacterium tumefaciens

اولین آنزیم هایی که عوامل بیماری زای گیاهی در هنگام روبرو شدن با دیواره های سلول گیاهی ترشح می کنند شامل یک دسته از پکتینازها شامل پلی گالاکتورونازها، پکتین لیازها، پکتات لیازها و پکتین استرازها می باشند که به منظور حمله به نواحی هوموگالاکتورونان دیواره سلولی، بیان می شوند. ژن بازدارنده پلی گالاکتوروناز 1 قادرند تشکیل کلونی های قارچی را محدود کنند. این کار با کندکردن فعالیت هیدرولیتیکی اندوپلی گالاکتورونازها و تجمع مناسب الیگوگالاکتورونیدها (محرک پاسخ های دفاعی مختلف گیاه) انجام می شود. در این بررسی، ژن پروتئین بازدارنده پلی گالاکتوروناز 1(Mdpgip1)، که در ناقل پلامسیدی pTZ19R همسانه سازی شده بود با استفاده از هضم آنزیمی، جدا و خالص سازی شد و طی فرآیند اتصال در جهت سنس و آنتی سنس به ناقل دوگانه pBI121 منتقل گردید. ناقل دوگانه pBI121 نوترکیب به باکتری مستعد E.coli و سپس به باکتری مستعد اگروباکتریوم منتقل د و کلونی های نوترکیب با استفاده از تکنیک های PCR و هضم آنزیمی تأئید شدند. در نهایت از باکتری های اگروباکتریوم حاوی ژن بازدارنده پلی گالاکتوروناز 1(Mdpgip1) استوک تهیه شد و تا زمان انتقال به گیاه، در دمای 80- درجه سانتیگراد نگهداری گردید.

Keywords:

سیب , بازدارنده پلی گالاکتوروناز 1 , pBI121 , Agrobacterium tumefaciens , دیواره سلولی