اندازه گیری فعالیت آنزیم فسفاتاز قلیایی و لیزوزیم در موکوس اپیدرم ماهی کپور معمولی(Cyprinus carpio)

هدف از این مطالعه تع یین سطح فعالیت آنزیم لیزوزیم و آنزیم فسفاتاز قلیایی در موکوس اپیدرم ماهی کپور معمولی بود، موکوس پوست دارای تعدادی از ضد میکروب ها مانند لیزوزیم، لکتین، آلکالین فسفاتاز و دیگر پروتئین هاست. حضور این آنزیم ها در موکوس اپیدرم نشان دهنده تکامل دستگاه ایمنی ذاتی ماهیان در دوره های مختلف تکاملی، در جهت سازگاری و بقا بیشتر این جانداران خونسرد در محیط زیست است. بدین منظور موکوس از سطح اپیدرم ماهی جمع آوری و پس از حل شدن در محلول بافر فسفات سدیم سانتریفوژ شد، برای تعیین سطح فعالیت آنزیم فسفاتاز قلیایی از دستگاه اسپکتروفتومتر و کیت های تولید شده توسط شرکت پارس آزمون استفاده گردید. سنجش آنزیم لیزوزیم به روش کدورت سنجی و به وسیله دستگاه اسپکتروفتومتر انجام شد؛ برای سنجش لیزوزیم از باکتری لیوفلیزه Micrococcus lyzodeikticus به عنوان سوبسترا استفاده شد؛ برای تهیه این سوسپانسیون، باکتری میکروکوکوس در بافر فسفات پتاسیم حل شد و جذب این محلول در مقابل شاهد(کووت حاوی بافر فسفات پتاسیم) در طول موج 450 نانومتر، 7/ 0- 6/ 0 تنظیم شد؛ کاهش در جذب سلول های میکروکوکوس لیزودیکتیکوس به مدت 10 دقیقه در طول موج 450 نانومتر ثبت گردید. یک واحد فعالیت آنزیم, به صورت مقدار آنزیمی که در طول موج 450 نانومتر و دمای 25 درجه سانتیگراد، کاهشی معادل 001 /0 در دقیقه در جذب سلول های میکروکووس لوتئوس ایجاد می کند، بیان می شود. نتایج نشان داد که آنزیم لیزوزیم و فسفاتاز قلیایی در شرایط طبیعی و عدم وجود عواملاسترس زا هرچند در مقدارکم، در موکوس اپیدرم ماهی کپور وجود دارد.

Keywords:

کپور معمولی , موکوس , لیزوزیم , فسفاتاز قلیایی