بررسی بیان فاکتور رشد عصبی بتای انسانی در دماها، زمانها و غلظتهای مختلف القاگر
Publish place: 12th Congress of Iranian Genetics Society
Publish Year: 1393
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 576
متن کامل این Paper منتشر نشده است و فقط به صورت چکیده یا چکیده مبسوط در پایگاه موجود می باشد.
توضیح: معمولا کلیه مقالاتی که کمتر از ۵ صفحه باشند در پایگاه سیویلیکا اصل Paper (فول تکست) محسوب نمی شوند و فقط کاربران عضو بدون کسر اعتبار می توانند فایل آنها را دریافت نمایند.
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
CIGS13_0419
تاریخ نمایه سازی: 7 بهمن 1393
Abstract:
کمپلکس فاکتور رشد عصبی با زیرواحدβ-NGFفعال خود، نقش قابل توجهی را در بقا، حفظ و تمایز سلولهای سیستم عصبی مرکزی ومحیطی ایفا میکند و به همین دلیل در درمان بیماریهای تخریب عصبی مورد توجه قرار گرفته است. جهت مطالعهی هرچه بیشتر توانایی این پروتئین در درمان بیماریهای مختلف از جمله ناهنجاریهای عصبی، مقدار زیادی ازβ-NGFانسانی بصورت نوترکیب و خالص مورد نیاز است.در این تحقیق، زیرواحدβ-NGFانسانی برای اولین بار در ایران بصورت نوترکیب مورد بیان قرار گرفت. توالیcDNA پروتئین β-NGF انسانی پس از بهینهسازی کدونی در وکتور،pET39b(+)با توانایی انتقال پروتئین به فضای اکسید کنندهی پری پلاسمی جهت تشکیل صحیح پیوندهای دی سولفیدی، ساب کلون و به منظور تکثیر و بیان به ترتیب به سویه هایGold10 وBL21(DE3)pLysSانتقال یافت. بیان در غلظتهای0/5یک، دو و سه میلی مولارIPTGبه مدت دو، سه، چهار، پنج، 16 ساعت و شبانه در دماهای 37و27و20درجه سانتیگراد صورت پذیرفت محتوای پروتئینی توسط اوره استخراج گردید. در نهایت از میان شرایط مذکور، بیانβ-NGFانسانی نوترکیب فقط در غلظت یک میلی مولارIPTGدر دمای 20 درجه سانتیگراد و به مدت 16 ساعت با استفاده از تکنیکهایSDS-PAGEدات بلات و وسترن بلات موردتایید قرار گرفت.
Keywords:
Authors
مونا سهرابی
دانشگاه تهران، دانشکده علوم و فنون نوین، گروه مهندسی علوم زیستی، تهران، ایران
زهرا حاجی حسن
دانشگاه تهران، دانشکده علوم و فنون نوین، گروه مهندسی علوم زیستی، تهران، ایران
معصومه رجبی بذل
دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، دانشکده پزشکی، گروه بیوشیمی بالینی، تهران، ایران