آپتامرهای DNAمبتنی برCell-SELEXبه عنوان نشانگر سرطان پروستات

مفهوم اتصال مبتنی بر ساختار جهت تهیه آپتامر ها در طول 25 سال گذشته ایجاد شد. آپتامر ها مجموعه ای از اسید های نوکلئیک تک رشته هستند که قادر به اتصال انتخابی به اهداف اختصاصی، از طریق فرایند تکراری انتخاب -تکثیر هستند. سرطان پروستات یکی از رایج ترین بدخیمی های مردان است. به دلیل ناکارآمدیPSAدر تمایز بزرگی خوش خیم پروستات از سرطان آن، آنتی ژن غشایی شدیدا اختصاصی تا به حال شناخته شدهPSMA که بیانش هم طی سرطان افزایش پیدا میکند به جهت تشخیص این سرطان، شناسایی شده است.در این مطالعه از روشCell-SELEXبرای انتخاب آپتامر های اختصاصی هدف استفاده شد. آپتامر های تک رشته شده با لامبدا اگزونوکلئاز با سلول های هدفLNCaP انکوبه شدند. توالی های متصل نشده شسته و توالی های متصل شده، جدا و برای سلکس معکوس روی رده ی سلولیPC-3 به منظور حذف توالی های متصل شونده به هر دو رده ی سلولی است استفاده شدند. پس از تکثیرتوالی های متصل نشده بهPC-3 در مراحل بعدی تعداد سلول ها و زمان انکوباسیون کاهش اما زمان و حجم بافر شستشو افزایش داده شد. پس از 10 مرحله انتخاب، مطالعات فلوسایتومتری کلون های مثبت نشان داد که 5 آپتامر تمایل بالای 70 % به هدف در مقایسه با کتابخنه اصلی دارند. در مقایسه باRNAآپتامربدست آمده در مطالعات قبلی ، ساختار های ثانویه حفظ شده در آپتامر های جدا شده احتمالا در اتصال به پروتئین طبیعی نقش دارند. براین باوریم که این نشانگرها میتوانند برای تشخیص زود هنگام بیماری و دارو رسانی مورد استفاده قرار بگیرند

Keywords:

سلکس سلول , آنتی ژن غشایی اختصاصی پروستاتPSMA , لامبدا اگزونوکلئاز , DNA آپتامر تک رشته