بررسی دمینهای کاتالیتیکی و غیرکاتالیتیکی یکی از پلولانازهای باکتری مقاوم به حرارتCohnella A01

پلولاناز تیپ EC3.2.1.41از آنزیمهای تجزیه کننده نشاسته میباشد که دارای دو فعالیت آلفا آمیلازی و پلولانازی است. این آنزیم پیوندهایα-(1→ و ( 6 α-(1→4 در نشاسته را شکسته و پلیساکارید آزاد میکند. ویژگیهای خاص این آنزیم، سبب شده تا در صنعت هیدرولیز نشاسته مورد توجه واقع شود. پس از استخراجDNAژنومی از باکتری کوهنلا و طراحی پرایمر، قطعه ی ژنی جدا شده و دروکتور pGEM-Tکلون شد. سپس با توالییابی ژن از صحت توالی قطعه کلون شده اطمینان حاصل گردید . از طریق هم ردیفی آمیلوپلولانازی به طولbp3678 و کدکنندهی 1199 اسید آمینه، با سایر توالی های باکتریایی تولید کننده ی آمیلوپلولاناز، 4 ناحیه کاتالیتیکی کاملا حفاظت شده شناسایی شد. همچنین شناسایی دمین غیر کاتالیتیکی مربوط به لایه سطحی در پایانهی کربوکسیلی این توالینشان داد که این آنزیم احتمالا به صورت خارج سلولی (متصل به سطح سلول) است

Keywords:

پلولاناز تیپ , نواحی حفاظت شده , همسانهسازی