انتقال ژن های اینترفرون گاما انسانی – اولئوسین (pBIIFNγ-Oleosin)به گیاه آفتابگردان(Helianthus annus L.)

بذرهای گیاهی به طور طبیعی پروتئین ها را سنتز و دخیره می کنند و مح لهای مناسبی برای هدفگیری پروتئین های نوترکیب می باشند. هدفگیری پروتئین های نوترکیب به اجسام روغنی در بذرها، باعث آسان تر شدن پروسه استخراج پروتئین های نوترکیب می شود، به همین دلیل می توان با استفاده از پیش برنده بذری و همچنین اتصال ژن مورد نظر به ژن اولئوسین گیاهی، باعث هد فگذاری صحیح پروتئین های نوترکیب به ا جسام روغنی می شود. در این تحقیق برای بیان اینترفرون گاما انسانی در بذر گیاه آفتابگردان و قرارگیری آن در اجسام روغنی، از ناقل نوترکیبpBIIFNγ-Oleosinاستفاده شد، که ژن اینترفرون گاما در پایین دست ژن اولئوسین همسانه سازی شده و بین دو ژن توالی برشی پروتئولایتیکی وجود دارد. این دو ژن تحت کنترل پیش برنده بذریNapinهستند. ریزنمونه های کوتیلدونی دو روزه از گیاه آفتابگردان، رقم های مستر و رکورد،برای تراریخ تسازی مورد استفاده قرار گرفتند. پلاسمید نوترکیب به کمکA. tumefaciensسویهLBA4404 به گیاهآفتابگردان منتقل شد. گزینش گیاهان تراریخت نیز بر روی محیط حاوی کانامایسسین صورت گرفت و در نهایت آنالیز گیاهان تراریخت در سطح DNAبا استفاده ازPCRوبا آغازگرهای اختصاصی ژن اینترفرون گاما، بیانگر انتقال موفقی تآمیز ژنIFNγبود.

Keywords:

اینترفرون گامای انسانی-اولئوسین , آفتابگردان , گیاه تراریخت , زراعت ملکولی , پروتئین های نوترکیب