طراحی و ساخت کلون بیان کننده داروی ضد انعقادی دسیرودین (هیرودین) به شکل خارج سلولی در اشرشیا کلی
Publish place: 8th national biotechnology congress of I.R. Iran & 4th National Conference on biosecurity
Publish Year: 1392
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 1,195
This Paper With 5 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
NBCI08_0585
تاریخ نمایه سازی: 29 شهریور 1394
Abstract:
اهداف: در این تحقیق، استفاده از Signal sequence مورد توجه قرار گرفته است با توجه به اینکه هیرودین به طور طبیعی فاقد Signal sequence است، در نظر گرفته شده است که با الحاق این بخش به ژن هیرودین و بیان پروتئین هیرودین، مکان ترشح پروتئین به فضای پری پلاسمیک با محیط خارج سلول و با سیتوپلاسم مشخص گردد و پروتئین محلول به دست آید. مواد و روش ها: ترادف 66 نوکلئوتیدی واریانت HV3 ژن هیرودین تهیه و داخل یک وکتور بیانی قوی (خانواده pET) انتقال داده شد. برای تسهیل درتخلیص پروتئین از His-tag در انتهای N ژن استفاده شد. سیگنال پپتید pelB در ابتدای ژن با هدف ترشح به فضای پری پلاسمیک و محیط کشت درج شد و بیان توسط سویه OrigamiB(DE3) اندازه گیری شد. در نهایت محصول تولیدی در سیتوپلاسم، فضای پری پلاسمی و محیط کشت اندازه گیری شد. نتایج: با روش SDS-PAGE بیان پروتئین دیده شد و با وسترن بلاتینگ بیان پروتئین هیرودین تایید شد. نتایج نشان داد مقدار پروتئین بیشتری در فضای پری پلاسمی بیان شده و مقدار کمی پروتئین به محیط کشت نیز ترشح شد.
Keywords:
Authors
سحر صباغ زاده
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتوپاستور ایران
زهرا جوانمیرپور شیرزادی
کارشناس ارشد سلولی و مولکولی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
پریسا بخشی
کارشناس ارشد بیوتکنولوژی، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انیستیتو پاستور ایران
حسن میرزاحسینی
استادیار، بخش بیوتکنولوژی پزشکی، انستیتو پاستور ایران
مراجع و منابع این Paper:
لیست زیر مراجع و منابع استفاده شده در این Paper را نمایش می دهد. این مراجع به صورت کاملا ماشینی و بر اساس هوش مصنوعی استخراج شده اند و لذا ممکن است دارای اشکالاتی باشند که به مرور زمان دقت استخراج این محتوا افزایش می یابد. مراجعی که مقالات مربوط به آنها در سیویلیکا نمایه شده و پیدا شده اند، به خود Paper لینک شده اند :