تولید آنتی بادی نوترکیب انسانی تک زنجیره متغیر (scFv) علیه فاکتور رشد اندوتلیال عروقی به روش نمایش فاژی

تحقیقات نشان می دهد که آنتی بادی مونوکلونال علیه فاکتور شد اندوتلیال عروقی (VEGF) که یکی از مهمترین محرک های آنژیوژنز می باشد می تواند باعث مهار رشد تومور شود . برای درمان بیماران سرطانی به تولید آنتی بادی های منوکلونال خالص در مقیاس بالا و استفاده مکرر از آنها نیاز است که جهت بهبود آن می توان از آنتی بادیهای مونوکلونال نوترکیب تک زنجیره متغیر (scFv) استفاده کرد ، که به مقدار زیاد در سیستم های باکتریایی قابل بیان می باشند و جهت کاربردهای ژن درمانی قابل استفاده می باشند . از جمله مزیتهای این آنتی بادیها می توان به قابلیت اتصال بالا ، اندازه کوچک، نفوذ پذیری بیشتر، بازده بالای تولید و عدم ایمونوژنیسیته (بدلیل حذف ناحیه Fc) آنها اشاره نمود . بنابراین آنتی بادی های تک زنجیره متغیر جایگزین مناسبی برای آنتی بادی منوکلونال در مصارف درمانی به حساب می آیند . در این پروژه از کتابخانه ژن scFv انسانی بل روش نمایش فاژی ، جهت جداسازی آنتی بادی scFv اختصاصی علیه VEGF استفاده شد. برای تولید آنتی بادی نوترکیب scFv انسانی ابتدا توالی هدف VEGF تهیه شد ، بعد از تکثیر کتابخانه ژنی و استفاده از پرتئین ،طی مراحل panning و با استفاده از روش ELISA ، آنتی بادی های با تمایل بالا به پروتئین VEGF جدا گردید .