استاندارد سازی تکنیکهای مولکولی تشخیص ویروس

روش غالب تکثیر مرکبات، پیوند ارقام تجاری روی پایه های بذری است . وجه مشترک همه بیماری های ویروسی و شبه ویروسی در مرکبات، قابلیت انتقال از طریق پیوند است . از این رو منطقی ترین راه کنترل این بیماریها ، تولید و توزیع نهال از درختان مادری عاری از ویروس است . بر این اساس استاندارد سازی تکنیک های مختلف تشخیص بیمارهای ویروسی جهت اطمینان از سلامت گیاهان اولیه منشا پیوندک حائز اهمیت است . بررسی کارایی روش های استخراج مبتنی بر دو نوع کیت تجاری، انتخاب آغازگر های مناسب از بین آغاز گر تصادفی) Random Hexamer Primers ) و آغاز گر های اختصاصی ( CPV2-CPV1 ، P63-P62 ، CtRSV4R-CtRSV4F ) و انتخاب بهترین شرایط RT-PCR دو مرحله ای بر اساس کنترل مثبت اسپانیایی ویروس پسوروز مرکبات انجام شد . تشخیص مولکولی ویروس پسوروز مرکبات با استخراج اسید نوکلئیک بر اساس کیت های Rneasy plant mini kit(Qiagen) و DENAzist total RNA isolation (دنازیست آسیا) و استفاده از آغاز گر های اختصاصی P63-P62 و آغازگر تصادفی نتایج مطلوبی به همراه داشت .

Keywords:

ویروس , پسوروز , مرکبات و RT-PCR