بررسی علل ترشح آنزیمهای لیپاز و فسفولیپاز توسط قارچهای مایکوریز

آنزیم لیپاز در صنعت کاربردهای بسیار وسیع و در پزشکی نیز برای تولید داروهای قلبی به کار میرود . آنزیم فسفولیپاز نیز در حضور سلول یک شاخص بیماریزایی(در این پژوهش این آنزیم از قارچ های خاک جداسازی گردید) محسوب میشود.به منظور بررسی توانایی تولید آنزیم¤های لیپازو فسفولیپاز توسط قارچ¤های بومی خاک¤های جنگلی ناهار خوران گرگان جهت استفاده در صنایع شوینده این پژوهش انجام شد. تعداد 20نمونه از خاک جنگلی ناهار خوران گرگان جمع¤آوری (عمق،گیاهان و ارتفاعات مختلف)، عمل رقت¤سازی روی نمونه¤های خاک انجام و به محیط کشت¤های PDA و YGCمنتقل شدند. پس از انجام خالص سازی(با توجه به رشد بهتر روی هر محیط)، شناسایی اولیه بر اساس مورفولوژی کلنی و بررسی میکروسکوپی انجام شد. در این مرحله جدایه¤ی قارچی جداسازی و شناسایی مقدماتی شدند توانایی تولید آنزیم¤هایلیپاز و فسفولیپاز قارچ¤ها با محیط کشت اختصاصی¤تری بوترین آگار و کی جی بررسی و قارچ¤های تولید کننده ی آنزیم براساس شعاع هاله هیدولیز شناسایی و انتخاب شدند.از جدایه هایی که هم دارای آنزیم لیپاز و فسفولیپاز بودند سه جدایه¤ای که بیشترین شعاع هیدورولیزی را داشتند، و از بین قارچ¤های مولد آنزیم لیپاز نیز تنها یک جدایه که بیشترین شعاع هیدورلیزی را داشت برای شناسایی مولکولی و تعیین توالی به آزمایشگاه میکروژن کره جنوبی ارسال گردید. سنجش کمی آنزیم¤ها به روش اسپکتوفتومتری در طول موج 410 نانومتر برای لیپاز و روی طول موج 280 نانومتر برای فسفولیپاز روی نمونه¤های آنزیم قارچی انجام شد.با توجه به این که تله گذاری برای جذب قارچ¤ها انجام نشده بود و خاکبه خودی خود عاری از مواد چرب (منبع لیپاز) می¤باشد می¤توان حضور این قارچ¤ها را در خاک اینگونه توجیه کرد:این قارچ¤ها زندگیهمزیست با گیاهان دارند و در این همزیستی متابولیت¤های دیگری تولید می¤کنند، در این قارچ¤ها از ویژگی ترشح این آنزیم خود در حالت عادی استفاده نمی¤کنند و بستگی به سوبسترای محیط دارد مانند باکتری سودوموناس که قدرت آنزیمی بالایی دارد اما در حالت عادی تمام آنزیم¤ها را هم زمان ترشح نمی¤کند به عنوان مثال با توجه به عبور و مرور انسان¤ها، گیاهان خشک شده، برگ¤های افتاده و ... مقداری چربیوارد خاک می¤شود ترشح آنزیم فسفولیپاز نیز نوعی رابطه¤ی مثبت مابین قارچ¤ها یا قارچ و گیاه میباشد که باعث شکسته شدن فسفولیپید به فسفر و لیپید میشود.فسفر یک عنصر محرک رشد برای گیاه و لیپید یک ماده¤ی غذایی برای قارچ است. در این پژوهش 3 قارچ موکور ، رایزوپوس و پنی سیلیوم به ترتیب بیشترین میزان ترشح آنزیم را داشتند.

Keywords:

مایکوریز , قارچ , لیپاز , فسفولیپاز