بهینه سازی بیان موقت ژن به واسطه آگروباکتریوم در بادام

از آنجاکه انتقال دایم ژن و تولید گیاه تراریخته به ویژه در گیاهان چندساله مانند بادام لازمه یصرف وقت و هزینه است، بهینه سازی عوامل مختلف اثر گذار در تراریزش گیاهان، مورد توجهقرار میگیرد. بیان موقت ژن با استفاده از اگروباکتریوم (اگرواینفیلتریشن) یک راهکار مفید برایبررسی عملکرد ژن در سیستم های بیانی متفاوت است. از آنجاکه بهینه کردن فاکتورهای موثر درروشهای تراریزش لازمه برنامه های انتقال ژن است، این پژوهش با هدف توسعه یک سیستمکارآمد برای بیان موقت به واسطه اگروباکتریوم در برگ های بادام، جهت پیشبینی سریع عملکردسیستم های تظاهر و پروتیین نوترکیب در بادام انجام شد. ژن گزارشگر لیکیناز برای ارزیابیعواملی که سطح بیان موقت را تحت تاثیر قرار میدهند، به کاربرده شد. مزیت اصلی استفاده ازاین ژن، سادگی کار، حساسیت بالا و ایمنی زیستی آن است. سه سیستم تظاهر مختلف حامل ژنلیکیناز، که تحت تاثیر عناصر تنظیمی متفاوت قرار داشتند به واسطه دو سویه اگروباکتریوم LBA4404 و GV3501با استفاده از سرنگ بدون سوزن به برگ های رقم های مامایی و شاهرود 12بادام انتقال دادهشد. بعد از سه روز میزان پروتیین فعال اندازه گیری شد. آزمون های آمارینشان داد که بیشترین میزان تولید پروتیین در برگ های رقم مامایی با استفاده از سیستم تظاهریکه موجب تجمع پروتیین در شبکه آندوپلاسمی میشود، با کاربرد سویه LBA4404 به دست می-آید. از اینرو سیستم تظاهر مربوطه و سویه باکتری LBA4404 و رقم مامایی بادام جهت دستیابیبه بادام تراریخته پیشنهاد میشود

Keywords:

اگرواینفیلتریشن , اگروباکتریوم , بادام , بیان موقت , سیستم تظاهر