جداسازی و همسانه سازی ژن آلفاآمیلاز از باکتری نمک دوست Nesterenkonia Sp.strain F در باکتری Ecoli

در سالهای اخیر کاربرد آنزیمها به عنوان کاتالیزور زیستی در بخشهای مختلف صنعتی افزایش یافته است. در این بین آمیلازها از مهمترین آنها هستند که در بیوتکنولوژی بسیار مورد توجه میباشند و در حال حاضر حدود %30 از بازار جهانی را به خود اختصاص داده اند. پیشرفتهای سریع در زمینه مهندسی ژنتیک انگیزه های جدیدی را در زمینه بیوتکتولوژی ایجاد کرده است. جداسازی و تعیین خصوصیات یک آنزیم جدید با ویژگیهای مطلوب مثل پایداری دمایی، مقاومت به شرایط قلیایی و نمک دوستی بسیار مهم است. باکتری Nesterenkonia Sp.strain F یک باکتری گرم مثبت و نمک دوست از خانواده Micro coccaceae است که پتانسیل بالایی برای تولید ترکیبات طبیعی دارد، همچنین مکانیسم های خاصی را برای سازگار شدن با شرایط به شدت افراطی دارا میباشد. در این تحقیق پس از استخراج ژنوم باکتریNesterenkonia Sp.strain F ، ژن کد کننده ی آنزیم آلفاآمیلاز بوسیله ی پرایمرهای اختصاصی متشکل از سایتهای برشی HindIII و EcoRI با استفاده از PCR تکثیر شد و پس از خالص سازی محصول PCR، قطعه مورد نظر داخل ناقل بیانی pET28b وارد شد و به باکتری Escherichia coli BL21 انتقال یافت.

Keywords:

بیوتکنولوژی , آلفاآمیلاز , کلونینگ , Nesterenkonia Sp.strain F , آنزیم صنعتی , باکتری نمک دوست