بررسی و معرفی روش PCR -step RT -One برای ردیابی و کشف ویروس عامل بیماری گامبورو (IBDV) در نمونه های کلینیکی

ویروس IBDV جزء خانواده Birnaviride و جنس Avibirnavirus است . ژنوم آن دارای RNA دو رشته ای است که دو پروتئین ساختاری vp2 و vp3 و سه پروتئین غیر ساختاری vp1 و vp4 و vp5 را کد می کندکه vp2 پروتئین ساختاری اصلی است . در سروتیپ I این ویروس در سال های اخیر ویروس های حاد و پاتوژنی یافت شده است که تلفات بالایی هم ایجاد می کند و الزاما نیازمند واکسیناسیون و روش های سریع و حساس برای تشخیص و تفریق آن از ویروس های دیگر است . روش های تشخیص معمول مانند سرولوژی و... زمان بر و سخت است و نمی تواند ویروس با حدت زیاد را از ویروس های معمولی تفریق دهد. در این مطالعه روش Single-tubenon-intrrapted, one-step RT-PCR, برای شناسایی جایگاه های مختلف و متغیر سکانس ژن vp2 در ویروس گامبورو (IBD) که روشی استاندارد و مناسب است بررسی و مورد ارزیابی قرار می گیرد و نیز تکنیک تصفیه و استخراج RNA این ویروس که در روش ردیابی مستقیم ویروس در نمونه های کلینیکی بسیار کاربردی و موفقیت آمیز بوده است ؛ بررسی می گردد. این تکنیک به علت حساسیت بیشتر و تشخیص سریع تر نسبت به روش های دیگر مناسب تر است . مهمترین اشکال روش PCR این است که نتایج مثبت کاذب به علت انتقال آلودگی در صفحات ایجاد می شود ولی در این روش one-step RT- PCR چون از ردیابی مستقیم ویروس پاتوژن در نمونه های کلینیکی استفاده می شود این مشکل به حداقل می رسد و نیز به علت حساسیت بالا، موارد مثبت های کاذب بسیار کاهش می یابد .

Keywords:

PCR one-step RT , گامبورو , IBDV