تاثیر انجماد شیش های تک فاکتوری در چند مرحله با به کارگیری غلظت های مختلف اتیلن گلیکول بر مورفولوژی بافت تخمدان موش

سابقه و هدف: با توجه به اهمیت نوع ضد یخ و مراحل آب گیری در روش انجماد شیشه ای هدف از این تحقیق بررسی انجماد شیشه ای تک- فاکتوری با استفاده از غلظت های مختلف اتیلن گلیکول در مراحل مختلف آب گیری در خصوص بافت تخمدان موش بود. مواد و روش ها: به منظور مطالعه ی کیفی بافت تخمدان پس از انجماد شیشه ای، 35 موش ماده ی بالغ نژاد NMRI با سن 10-6 هفته انتخاب شدند و پس از خارج ساختن بافت تخمدان آن ها به شکل تصادفی در سه گروه کنترل، آزمون سمیت و انجماد شیشه ای قرار گرفتند. در گروه های انجمادی پس از آب گیری یکسان نمونه ها در غلظت های 2 و 4 مول (هر مرحله به مدت یک دقیقه) با توجه به غلظت نهایی 6 و یا 8 مول زمان های متفاوت آب گیری 4، 6 و 8 دقیقه برای هر کدام از غلظت ها در نظر گرفته شد و سپس در ازت مایع غوطه ور و به مدت یک هفته نگهداری شدند. بعد از گرم کردن نمونه ها، در ساکاروز 1 مول شستشو و به تعادل رسیدند. همچنین آزمون سمیت در خصوص تمام غلظت ها انجام شد. بافت های تخمدان تازه، منجمد شده و آزمون سمیت در محلول فرمالدهید 10 درصد تثبیت شده و پس از قالب گیری در پارافین و برش گیری های پیدرپی با هماتوکسیلین و ایوزین رنگ آمیزی و سپس مطالعه کیفی شدند. نتایج: بافت تخمدان در گروه های انجمادی با غلظت های متفاوت اتیلنگلیکول و نیز زمان های مختلف آب گیری مورفولوژی طبیعی و مشابه داشتند. ساختار فولیکول های پرهانترال و انترال به خوبی حفظ شده بود به ویژه فولیکول های بدوی و پرهانترال با اندازه ی کوچک در نواحی قشری تخمدان کاملا طبیعی بودند. نتیجه گیری: نتایج حاصل از این تحقیق نشان داد که اولا غلظت های بالای اتیلن گلیکول برای تخمدان سمی نبوده، دوما زمان آب گیری 4 تا 8 دقیقه باعث پیدایش برهم ریختگی بافت تخمدان طی مراحل انجماد و ذوب نشده است. گرچه اثرات دقیق این ضدیخ نیاز به مطالعات بیشتری دارد.

Keywords:

انجماد شیشه ای چند مرحل های , اتیلن گلیکول , بافت تخمدان