جداسازی ژن AtPCSI از گیاه آرابیدوپسیس تالیانا و همسانه سازی آن در ناقل pVLT33
Publish place: 4th International Congress of Developing Agriculture, Natural Resources, Environment and Tourism of Iran
Publish Year: 1398
نوع سند: مقاله کنفرانسی
زبان: Persian
View: 601
This Paper With 6 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
ICSDA04_0124
تاریخ نمایه سازی: 4 دی 1398
Abstract:
فلزات سنگین در خاک به صورت زیستی قابل تجزیه نیستند و این واقعیت آنها را به یک یاز خطرناک ترین آلاینده های زیست محیطی تبدل کرده است. با توجه به معایب روش های فیزیکی و شیمیایی و گیاه پالایی در حذف فلزات سنگین خاک، استفاده از مهندسی ژنتیک می تواند روش مطمئن تری بدین منظور باشد. هدف از این مطالعه جداسازی ژن فیتوکلاتین سنتتاز از گیاه آرابیدوپسیس تالیانا و همسانه سازی آن در ناقل pVLT33 بود. ابتدا بذور گیا تهیه و در شرایط مناطب کشت گردیدند و پس از رشد کافی به منظور اعمال تنش به محیط هیدروپونیک یک دوم MS حاوی کلرید کادمیوم منتقل شدند. از نمونه های برگی RNA کل استخراج و در ادامه cDNA تک رشته ای سنتز شد. به منظور جداسازی ژن، آغازگرهای اختصاصی طراحی و پس از بهینه سازی شرایط PCR، ژن مورد نظر با استفاده از آنزیم pfu تکثیر شد. در مرحله بعد قطعه تکثیر شده، به وسیله تکنیک همسانه سازی T/A در ناقل pTZ57R/T درج شده، ناقل نوترکیب حاصل توسط کلونی PCR، برش های آنزیمی و همچنین توالی یابی تایید شد. در ادامه با استفاده از تکنیک برش و اتصال، ژن تکثیر شده در ناقل pVLT33، کلون و سازه به دست آمده به وسیله توالی یابی تایید شد. این سازه سنتز شده که مناسب انتقال به باکتری ریزوبیوم بود، اصطلاحا pVLT33-PCSI نام گذاری شد.
Keywords:
Authors
مریم علی پور
دانش آموخته کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی کشاورزی
اسماعیل قاسمی گوجانی
استادیار گروه بیوتکنولوژی دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی خوزستان