همسانه سازی مولکولی، شناسایی و بررسی بیان ژن گلوتاتیون ردوکتاز تحت تنش خشکی در انگور عسکری

تنش خشکی به عنوان یکی از مهم ترین تنش های غیر زنده، تولید انواع مختلف گونه های اکسیژن فعال (ROS) را القاء نموده و منجر به تنش اکسیداتیو می شود. گلوتاتیون ردوکتاز عضوی از خانواده فلاووپروتئین اکسیدوردوکتازها بوده و در پروکاریوت ها و یوکاریوت ها وجود دارد. این آنزیم با حفظ گلوتاتیون درون سلولی در وضعیت احیاء شده (GSH)، نقش مهمی در پاسخ به تنش اکسیداتیو در گیاهان ایفاء می کند. توالی cDNAی کامل کد کننده ژن گلوتاتیون ردوکتاز تحت عنوان VvGr از بافت حبه انگور عسکری (Vitis vinifera L. cv. Askari) با استفاده از تکنیک واکنش زنجیره ای پلی مراز نسخه برداری معکوس (RT-PCR) جداسازی و درون ناقل پلاسمیدی pTG19-T همسانه سازی شد. تعداد نوکلئوتیدهای توالی ژن جداسازی شده 1491 نوکلئوتید بود که پروتئینی با 496 آمینواسید را کد می کند. وزن مولکولی و نقطه ایزوالکتریک پروتئین کد شده توسط ژن VvGr به ترتیب برابر 81/53 کیلو دالتون و 72/5 است. بررسی بیان این ژن به روش RT-PCR نیمه کمی نشان داد که این ژن در میوه و ریشه این انگور به میزان زیادی بیان شده و همچنین تحت تنش خشکی بیان آن افزایش یافت.

Keywords:

گلوتاتیون ردوکتاز , بررسی بیان , تنش خشکی , RT-PCR نیمه کمی.