شناسایی آلودگی مایکوپلاسمایی در کشت های سلولی به روش PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی 16S Rrna
Publish place: Paramedical Sciences and Military Health، Vol: 12، Issue: 2
Publish Year: 1396
نوع سند: مقاله ژورنالی
زبان: Persian
View: 380
This Paper With 8 Page And PDF Format Ready To Download
- Certificate
- من نویسنده این مقاله هستم
استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:
شناسه ملی سند علمی:
JR_JPSMH-12-2_003
تاریخ نمایه سازی: 6 اسفند 1398
Abstract:
مقدمه: مایکوپلاسماها از مه مترین و جد یترین آلوده کننده های کشت های سلولی و فرآورده های بیولوژیک تولیدی در کشت های سلولی می باشد. تشخیص مایکوپلاسماها بر پایه کشت و روش های مولکولی می باشد. این روش ها از نظر سرعت، اطمینان، ویژگی و حساسیت با یکدیگر متفاوت هستند. هدف اصلی این مطالعه ردیابی آلودگی های مایکوپلاسمایی درنمونه های کشت با استفاده از پرایمرهای اختصاصی 16S rRNA بر اساس تکنیک PCR می باشد. مواد و روش ها: توالی ژن 16S rRNA گونه های مایکوپلاسمای آلوده کننده کشت های سلولی از بانک ژن استخراج و هم ردیف سازی گردید. پرایمرهای اختصاصی با استفاده از ترادف های به دست آمده، طراحی شد. برای ساخت کنترل مثبت، توالی ژن 16S rRNA به روش PCR تکثیر و سپس در وکتور پلاسمیدی کلون شد. نتایج: الکتروفورز محصول PCR ژن 16S rRNA مطابق انتظار باندی به طول 219 bp را بر روی ژل آگاروز نشان داد. این الگو در نمونه های کنترل منفی دیده نشد. همچنین تکثیر قطعه ای به همین اندازه در پلاسمید نوترکیب حاصل، صحت کلونینگ را تایید کرد.بحث و نتیجه گیری: این روش با داشتن مزیت هایی مانند سرعت بالا و دقت زیاد از پتانسیل مناسبی برای استفاده در آزمایشگاه های کشت سلول برخوردار است.
Keywords:
Authors
زهره سهیلی
گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد قم، قم، ایران
محمد سلیمانی
گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران
کیوان مجیدزاده
مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی تسنیم، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران