تولید نیمه صنعتی واکسن کشته ORT

عفونت های تنفسی مهمترین بیماری هایی هستند که طیور صنعتی را درگیر می کنند. اورنیتو باکتریوم راینوتراکیال یک باکتری است که باعث عفونت های تنفسی شامل تورم کیسه هوایی و ذات الریه و پرندگان می گردد.هدف از اجرای این طرح تبدیل واکسن آزمایشی به واکسن نیمه صنعتی می باشد. تکثیر بذر واکسن در محیط کشت BHI انجام گرفت. باکتری کشت داده شده توسط فرمالین غیرفعال گردید و آزمایشات کنترلی بر روی آن انجام شد. آنتی ژن بدست آمده با استفاده از روغن مونتاناید فرموله گردید و سپس با استفاده از دستگاه هموژنایزر، هموژنیزه گردید. تعداد 80 عدد جوجه SPF تا سن 14 روزگی نگهداری گردید، شرایط دمایی، رطوبت بر اساس استاندار های موجود رعایت گردید، در سن 14 روزگی جوجه ها به 3 گروه تقسیم گردیدند. گروه اول شامل 50 عدد جوجه که به آنها واکسن ORT تهیه شده تزریق گردید، گروه دوم شامل 15 عدد جوجه بعنوان کنترل ، که به آنها PBS تزریق گردید گروه سوم نیز شامل 15 جوجه که هیچ گونه تزریقی به آنها انجام نگرفت . هر 3 گروه در اطاقهای جداگانه لیکن با شرایط یکسان از لحاظ دما، نور، رطوبت و غذا نگهداری گردیدند.خونگیری از جوجه ها بطور مرتب هر هفته جهت جداسازی سرم و بررسی تیتر آنتی بادی انجام می گرفت در هفته پنجم یک مرحله دیگر واکسن یادآور به جوجه ها تزریق گردید و مجددا تا پایان هفته نهم خونگیری انجام شد. جوجه ها هر روز از لحاظ مرگ و میر و همچنین هر گونه واکنش در محل تزریق مورد بررسی قرار گرفت. سه هفته پس از تزریق از کلیه جوجه از طریق سیاهرگ زیر بال خونگیری گردید و سرم ها جدا سازی شدند.. سرم جوجه های SPF ایمن سازی شده ( واکسینه شده ) با واکسن ORT و همچنین سرم جوجه های SPF کنترل براساس توصیه سازنده کیت الیزا و به روش گفته شده برای بررسی پاسخ ایمنی همورال جوجه ها به واکسن مورد بررسی قرار گرفتند جهت بررسی میزان کارآیی واکسن از کیت IDEX میزان آنتی بادی ارزیابی گردیدآزمایشات کارایی (Potency)، پایداری (Stability) و باکتریایی بر روی واکسن فوق صورت گرفت. واکسن بدست آمد. به جوجه های SPF تلقیح گردید و تیترآنتی بادی تا 9 هفته بعد از تزریق با استفاده از کیت الیزا(ELISA) ارزیابی گردید.نتایج نشان داد که واکسن فوق تیترآنتی بادی معنی داری در مقایسه با گروه های کنترل ایجاد کرده است.واکسن فوق پایداری استانداری نیز دارا بود. نتایج نشان داد که پس از تزریق نوبت دوم تیترآنتی بادی بالا می رود و تا 9 هفته پس از تزریق تقریباثابت باقی می ماند.واکسن ORT می تواند باعث ایجاد ایمنی در جوجه ها شود و می تواند پرنده را درمقابل بیماری مصون نماید.