انجماد لاین های سلولی LK Vero با استفاده از ماده محافظSericin Silk Protein فاقد سرم در مقایسه با محافظ مرسوم

روش انجماد سلول فرآیندی کار آمد و متداول برای حفظ خصوصیات فیزیولوژیک سلول های جانوری محسوب می شود و کارهای علمی بسیاری برای افزایش کیفیت محلول های نگهدارنده جهت حفظ طولانی مدت خصوصیات سلول ها انجام گرفته است. در این تحقیق برای نگهداری لاین های سلولی مورد استفاده در تولید واکسنهای ویروسی دامی از محیط محافظ سرمای فاقد سرم استفاده می شود تا بتوان مشکلات احتمالی ایجاد شده توسط سرم را کاهش و یا حذف نمود. بدین منظور، کشت و تهیه سوسپانسیون سلول های لاین LK و Veroدر محیط های Hanks و DMEM حاوی 10 درصد سرم و انکوباسیون به مدت دو روز انجام شد. سلول های لاین در ماده محافظ های فاقد سرم و حاوی سرم DMSO or DMEM + DMSO or Hanks+ DMSO Sericin1%+ ویا FBS10% + DMSO و تانک ازت منجمد و ذخیره شدند. سپس میزان زنده ماندن و رشد سلول های منجمد ذخیره شده، پس از ذوب در زمان های 1ماه و 2ماه و پس از 3 ماه سپس هر شش ماه به مدت دو سال بررسی و ثبت شد. از نرم افزار SPSS-22 و آزمون ناپارامتریy2 ( کای دو) جهت آنالیز داده ها استفاده شد و P< 0.05 به عنوان سطح معنی دار در نظر گرفته شد. در بررسی میزان زنده ماندن سلول LK در محیط Hank's و محیط سرم FBS در مقایسه با محیط حاوی ماده محافظ سریسین در تمامی زمان های خروج سلول از انجماد در ماه های 1، 2، 6، 12، 18و24پس از ذخیره سازی تفاوت معنی داری در05/ 0 P< مشاهده شد و میزان بقای سلول ها در همه زمان ها در ماده محافظ سریسین از همه محیط های دیگر بیشتر بود. در تمامی زمان های برداشت 1، 2، 6، 12، 18و 24 ماه پس از ذخیره سازی سلول های Vero میزان زنده ماندن سلولها در سه محیط سریسین ، محیط DMEM و سرم FBS در همه موارد تفاوت معنی داری در05/ 0 P< مشاهده شد و در همه زمان ها میزان زنده ماندن سلول در ماده محافظ سریسین بیشتر بود. نتایج پژوهش حاضر بیانگر آن است که محیط کشت حاوی Sericin بدون سرم برای انجماد وذخیره سازی سلولی مفید است. این ماده محافظ برای ماندگاری و رشد سلول های LK و Vero جایگزین مناسبی برای سرم می باشد. واژه های کلیدی: انجماد سلول، کشت سلول، ماده محافظ، فاقد سرم