بررسی فراوانی جهش های رایج در آنزیم استیل کوآنزیم آ کربوکسیلاز ‭(ACCase) ‬جمعیت های یولاف مقاوم مزارع گندم ایران

نوع محتوی: طرح پژوهشی
Language: Persian
استان موضوع گزارش: تهران
شهر موضوع گزارش: تهران
Document ID: R-1053998
Publish: 16 February 2019
دسته بندی علمی: علوم کشاورزی
View: 350
Pages: 48
Publish Year: 1394

نسخه کامل Research منتشر نشده است و در دسترس نیست.

  • من نویسنده این مقاله هستم

استخراج به نرم افزارهای پژوهشی:

لینک ثابت به این Research:

Abstract:

به منظور بررسی فراوانی جهش های رایج در آنزیم ‭ACCase ‬جمعیت های یولاف مقاوم مزارع گندم استان های فارس و کرمانشاه، آزمایشی طی سال های ‮‭1391-93‬ در موسسه تحقیقات گیاه پزشکی کشور انجام شد. در این پروژه ‮‭55‬ توده یولاف وحشی ابتدا با کاربرد دوز توصیه شده علف کش کلودینافوپ-پروپارژیل (‮‭64‬ گرم ماده موثره در هکتار) در مرحله ‮‭3-2‬ برگی یولاف وحشی در گلخانه غربال شدند. چهار هفته پس از سمپاشی توده ها بر اساس درصد زنده مانی، وزن تر و وزن خشک نسبت به شاهد، با استفاده از روش های ادکینز و موس از نظر مقاومت به علف کش گروه بندی شدند. مطالعات مولکولی با استفاده از از روش ها ‭CAPS ‬و ‭dCAPS ‬بر روی توده ها انجام شد. هر دو روش شامل سه مرحله استخراج ‭DNA‬، ‭PCR ‬با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و در نهایت هضم توسط آنزیم برشی اختصاصی بود. از روش ‭CAPS ‬برای مطالعه جهش های ایزولوسین-‮‭2041‬-آسپاراژین و سیستین-‮‭2088‬-آرژنین و از روش‭dCAPS ‬برای مطالعه جهش های ایزولوسین-‮‭1781‬-لوسین و اسید اسپارتیک-‮‭2078‬-گلایسین در ژن ‭ACCase ‬پلاستیدی استفاده شد. در نهایت فراوانی هر یک از جهش های فوق تعیین شد. بر اساس روش ادکینز ‮‭41‬ توده مقاوم، ‮‭11‬ توده احتمالا مقاوم و 3 توده به علف کش کلودینافوپ پروپارژیل حساس بودند. ارزیابی بر اساس روش موس نیز نشان داد که ‮‭50‬ توده در گروه ‭RRR (‬مقاومت بالا)، 4 توده در گروه ‭RR (‬مقاومت بالا با احتمال کاهش اثر علف کش) و یک توده در گروه ‭R? (‬مشکوک به مقاومت) قرار گرفت. نتایج آزمایشات مولکولی حاکی از وجود جهش در ‮‭35‬ بیوتیپ یولاف وحشی مقاوم بود. مطالعه مولکولی به روش ‭CAPS ‬نشان داد که 9 بیوتیپ (،1 ،3 ،‮‭16‬ ،‮‭20‬ ،‮‭66‬ ،‮‭67‬ ،‮‭69 68‬ و ‮‭73‬) در جایگاه ‮‭2041‬ دارای جهش می باشند، اما در هیچ کدام از توده های مورد مطالعه جهش در نقطه ‮‭2088‬ رخ نداده بود. همچنین نتایج مطالعات مولکولی به روش ‭dCAPS ‬نشان داد که ‮‭20‬ بیوتیپ (،‮‭14‬ ،‮‭18‬ ،‮‭19‬ ،‮‭21‬ ،‮‭23‬ ،‮‭25‬ ،‮‭26‬ ،‮‭27‬ ،‮‭28‬ ،‮‭29‬ ،‮‭32‬ ،‮‭33‬ ،‮‭65‬ ،‮‭75‬ ،‮‭76‬ ،‮‭77‬ ،‮‭81 80‬ و ‮‭83‬) به دلیل جهش در جایگاه ‮‭1781‬ و 6 بیوتیپ (،3 ،‮‭22‬ ،‮‭30‬ ،‮‭78 70‬ و ‮‭84‬) به دلیل جهش در نقطه ‮‭2078‬ ژن کدکننده آنزیم ‭ACCase‬، دارای مقاومت هستند. بر این اساس وقوع جهش ایزولوسین-‮‭1781‬-لوسین با ‮‭36/36‬ درصد بیشترین فراوانی را نسبت به سایر جهش ها داشت. همچنین عدم تایید مقاومت بر اساس آزمایشات مولکولی در ‮‭17‬ توده دیگر (که در آزمایش گلخانه ای در گروه مقاوم قرار گرفتند) را میصتوان به وجود جهش در نقاط دیگر ژن کد کننده آنزیم ‭ACCase ‬یا مکانیزم مقاومت مبتنی بر غیر محل هدف (متابولیسم) مربوط دانست. کلمات کلیدی: جهش، مقاومت به علف کش،یولاف وحشی، ‭CAPS ‬و ‭dCAPS