فیوژن ژن های توکسین و کلستریدیوم پرفرینجنز تیپ ‭D ‬و ‭B ‬و بیان آن در ‭E.coli ‬جهت مطالعه ایمونولوژیک

باکتری ‭Clostridium perfringens ‬یک باسیل گرم مثبت بی هوازی هاگ دار و بیماری زا است که در طبیعت، و سیستم گوارش و برخی دیگر از اندام های بدن انسان و دام، به وفور یافت می شود. توکسین های اپسیلون و بتا از توکسین های اصلی ‭C. perfringens ‬تیپ های‭D ‬و‭B ‬هستند که از فاکتورهای ویرولانس در این تیپ ها بوده و عامل ایجاد بیماری های انتریت نکروزی، انتروتوکسمی و قلوه نرمی در گوسفند، بز و بندرت در گوساله محسوب می گردند. در پژوهش حاضر توالی ژن های اپسیلون و بتا از بانک ژن به دست آمد و یک ساختار نوترکیب کایمریکساخته شد. تولید فیوژن ژن بر مبنای فیوژن ‭PCR ‬انجام شد. دو ژن پس از تکثیر، توسط یک توالی رابط آب دوست با یکدیگر ادغام و فیوژن ژن حاصله در باکتری ‭E. coli ‬بیان شد. بیان پروتیین نوترکیب اپسیلون- بتا به روش ‭SDS-PAGE ‬و وسترن بلات تایید شد و سپس پروتیین نوترکیب تخلیص گردید. ایمنی زایی فیوژن پروتیین در موش به عنوان یک مدل جانوری بر علیه کشت فعال ‭C. perfringens ‬بررسی و تایید گردید و تاثیر فیوژن پروتیین نوترکیب روی موش را نشان داد. کلید واژه‭: C. perfringens‬، ‭DNA ‬نوترکیب، توکسین اپسیلون و بتا، فیوژن پروتیین، ایمنی زایی