طراحی و ارزیابی یک روش ‭multiplex PCR ‬در تشخیص وجود عفونت ویروسصهای نیوکاسل، برونشیت و آنفلوانزا در طیور

از مهم ترین این بیماری های ویروسی که سوددهی صنعت طیور را تحت تاثیر قرار می دهند، بیماری های ویروس های برونشیت عفونی، نیوکاسل و آنفلوانزای طیور است. شناسایی اولیه و سریع این بیماری ها حایز اهمیت بسیار بالایی است. روش ‭Multiplex PCR ‬که قابلیت تشخیص همزمان چند ویروس را در آن واحد به ما می دهد یکی از بهترین روش هایی است که امروزه در تشخیص بیماری های ویروسی مورد استفاده قرار می گیرد. بنابراین با استفاده از این روش می توان سه ویروس فوق را به روشی بسیار کم هزینه تر و سریع تر شناسایی نمود. هدف از این مطالعه شناسایی همزمان آلودگی با سه ویروس برونشیت، نیوکاسل و آنفلوانزا به روش ‭Multiplex PCR ‬در یک واکنش است. پس از استخراج ‭RNA ‬ژنومی سه ویروس برونشیت، نیوکاسل و آنفلوانزا از سویه های استاندارد آن ها، ‭DNA ‬مکمل هریک ساخته شد. سپس واکنش ‭PCR ‬برای هر یک از ویروس ها به طور جداگانه طراحی و بهینه سازی شد. سپس شرایط واکنش برای ویروس ها به صورت دو به دو بررسی گردید، و نهایتا یک واکنش ‭Multiplex PCR ‬برای هر سه ویروس به طور همزمان انجام شد و باندهای مربوط به هر ویروس به طور همزمان بررسی شد. نتایج: سه باند ‮‭637‬ ‭bp ‬برای ‮‭234‬ ‭IBV‬، ‭bp ‬برای ‭NDV ‬و ‮‭493‬ ‭bp ‬برای ‭HN ‬در یک ستون روی ژل آگارز قابل مشاهده بودند. با توجه به گسترش روزافزون صنعت طیور و تاثیر هرچه بیشتر آن بر اقتصاد کشورها و دنیا، نیاز به شناسایی هرچه سریع تر و دقیق تر بیماری ها خصوصا بیماری های ویروسی نیازی مبرم به نظر می رسد. بنابراین، استفاده از روش های نوین مولکولی همچون ‭Multiplex PCR ‬می تواند مراکز پرورش طیور را در تشخیص و درمان این بیماری های ویروسی بسیار کمک کند. نتایج نشانگر آن است که از این روش می توان به عنوان یک روش سریع و حساس تشخیصی برای این سه پاتوژن مهم تنفسی طیور بهره جست.